【摘 要】
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以苜蓿基因组DNA为模板,利用正交设计,对影响ISSR反应体系的主要因素（Taq酶、Mg2＋、dNTP、引物和模板）从4个水平上进行筛选和优化,建立了适合苜蓿的最佳ISSR反应体系：20μL反应体
【机 构】
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齐齐哈尔大学生命科学与农林学院,甘南县一中,黑龙江省畜牧研究所
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以苜蓿基因组DNA为模板,利用正交设计,对影响ISSR反应体系的主要因素（Taq酶、Mg2＋、dNTP、引物和模板）从4个水平上进行筛选和优化,建立了适合苜蓿的最佳ISSR反应体系：20μL反应体系中加83.4 nkat Taq酶,2.0 mmol/L Mg2＋,10×PCR Buffer 2.0μL,0.4 mmol/L dNTP,0.2 mmol/L引物,2.5 ng DNA模板.PCR扩增反应程序为：94℃预变性4 min（94℃变性1 min,45~53℃退火1 min,72℃延伸1 m
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