胃电刺激对大鼠胃扩张反应神经元及增食欲素的影响

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目的:观察胃电刺激(GES)对大鼠下丘脑腹内侧区(VMH)胃扩张(GD)相关神经元的作用及脑内增食欲素(orexin)表达的影响,初步探讨 GES的中枢作用机制.方法:选用成年Wistar大鼠52只,采用细胞外记录神经元单位放电方法,记录VMH神经元自发放电活动,根据神经元对胃扩张刺激反应的不同,分为胃扩张兴奋性神经元(GD-E) 和胃扩张抑制性神经元(GD-I).观察3组不同参数的胃电刺激(GES1,GES2,GES3)对VMH 内GD-E和GD-I放电频率的影响:GES1(6 mA, 0.3 ms,40 Hz,2 s-on,3 s-off)为标准参数; GES2的串刺激持续时间减少为0.1 s:GES3的串刺激频率减少至20 Hz,其他参数均同GES1.采用免疫荧光组织化学染色方法和放射免疫分析法观测胃电刺激2 h对大鼠下丘脑外侧区 (LHA)增食欲素-A(orexin-A)阳性神经元和不同脑orexin含量表达的影响.结果:VMH记录的96个神经元中有82个神经元(85.41%)对胃扩张刺激(GD,3-5 mL, 10-30 s)有反应,其中31个(37.8%)为胃扩张兴奋性(GD-E)神经元,51个(62.2%)为胃扩张抑制性(GD-I)神经元.GES1,2,3分别兴奋了 55.0%,17.6%,14.3%的GD-E神经元.GES1对 GD-E神经元的作用明显强于GES2和GES3 (P=0.002,P=0.016).63.6%,37.9%和51.9%的GD-I神经元分别被GES1,2,3所兴奋,其中 GES2的兴奋作用较弱(P=0.043).GES1刺激胃窦部2 h,下丘脑LHA orexin-A免疫阳性神经元表达明显减少(6.97±1.51/0.1 mm2 vs 26.62 ±8.30/0.1 mm2,P<0.01):且下丘脑、中脑、延脑和孤束核中orexin免疫反应物(IR)的含量与对照组相比明显减少(112.54±11.58 fmol/ mg vs 185.23±15.22 fmol/mg,P<0.01:71.95 ±8.45 fmol/mg vs 98.48±12.02 fmol/mg. P<0.05;72.36±6.58 fmol/mg vs 101.29± 15.22 fmol/mg.P<0.05;69.12±4.99 fmol/mg vs 89.21±9.23 fmol/mg,P<0.05),但脑桥内 orexin-IR的含量与对照组相比无显著差异.结论:GES可兴奋下丘脑“饱中枢”-VMH内胃扩张反应性神经元,电刺激作用的强弱与 GES刺激的频率和刺激的持续时间有关:脑内 orexin的降低可能也参与了GES的中枢作用机制.
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