【摘 要】
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目的设计一个抗缺氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA的锤头状核酶,并构建它的基因表达载体,以便用于肿瘤的基因治疗.方法用RNA结构分析软件预测HIF-1α mRNA的二级结构并选择合适的
【机 构】
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徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心,徐州医学院病理学教研室
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目的设计一个抗缺氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA的锤头状核酶,并构建它的基因表达载体,以便用于肿瘤的基因治疗.方法用RNA结构分析软件预测HIF-1α mRNA的二级结构并选择合适的核酶作用靶点,以选定的靶点设计相应的锤头状核酶,合成编码核酶的DNA并克隆到载体pSP72上,酶切及DNA测序鉴定核酶序列.结果HIF-1α mRNA的72位含有GUC三联体,可以作为核酶的切割靶点,设计的核酶包括22nt的催化活性中心和16 nt的侧翼序列.计算机辅助预测证明此位点为合适的靶点,限制性内切酶和DNA测序
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