猪IFNα基因在毕赤酵母中的高效分泌表达

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【摘要】

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巴斯德毕赤酵母载体质粒pPICZαA含有强启动子PAOXI和α-MF信号肽序列,构建猪IFNα基因的重组质粒pPICZαA-IFNα,并转入E.coli JM109中,得到转猪IFNα基因工程菌,经酶切鉴定

【作者】

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黄海谢蓓于瑞嵩刘惠莉张德福曹祥荣李震

【机构】

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南京师范大学生命科学学院,上海市农业遗传育种重点实验室,南京师范大学生命科学学院

【出处】

：

遗传

【发表日期】

：

2005年2期

【关键词】

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猪 IFNΑ 巴斯德毕赤酵母基因重组分泌表达 Po IFNα Pichia pastoris gene recombination secretory e

【基金项目】

：

上海市农业科学院中青年学术和技术带头人培养基金

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巴斯德毕赤酵母载体质粒pPICZαA含有强启动子PAOXI和α-MF信号肽序列,构建猪IFNα基因的重组质粒pPICZαA-IFNα,并转入E.coli JM109中,得到转猪IFNα基因工程菌,经酶切鉴定克隆到载体pPICZαA上的外源基因即为猪IFNα基因.通过电击将经SαcⅠ酶切后线性化的pPICZαA-IFNα质粒转化到巴斯德毕赤酵母KM71中.SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物的结果表明,分泌于胞外的猪IFNα蛋白分子量比猪IFNα理论值分子量稍大,估计是糖基化的原因.表达的

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