目的 了解问号钩端螺旋体脂多糖(L-LPS)体外诱导小鼠单核-巨噬样细胞株(J774A.1)凋亡及Toll样受体(TLR)和相关信号通路调控细胞凋亡的作用.方法 酚水法从问号钩体黄疸出血群赖型赖株中提取L-LPS.流式细胞术测定L-LPS诱导J774A.1细胞凋亡及FasL中和抗体阻断细胞凋亡的作用.实时荧光定量RT-PCR(qPCR)及流式细胞术检测L-LPS作用前后J774A.1细胞Fas/FasLmRNAs和蛋白表达水平变化.TLR2或TLR4抗体封闭试验、信号通路阻断试验及流式细胞术,检测TLR2、TLR4及p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和胞外信号调节激酶(ERK)通路对L-LPS诱导细胞凋亡的调控作用.结果 100 ng/ml L-LPS作用J774A.1细胞4、12和24 h的凋亡率分别为56.50%、69.28%和24.35%,FasL中和抗体封闭后,细胞凋亡率分别下降至11.21%、21.58%和12.70%(P＜0.05).L-LPS作用4、12和24 h的J774A.1细胞FasL和Fas mRNAs水平分别为正常细胞的1.34、2.12、2.10及2.45、3.87、3.12倍(P＜0.05),FasL和Fas蛋白表达率分别从L-LPS作用前的4.82%和15.32%上调至18.61%、60.13%、42.75%(P＜0.05)和76.34%、85.70%和77.92%(P＜0.05).TLR2抗体封闭后L-LPS诱导J774A.1细胞的凋亡率(11.54%)明显低于未封闭细胞(66.56%,P＜0.05),但TLR4抗体封闭细胞的凋亡率仍高达55.27%(P＞0.05).p38MAPK与JNK通路阻断后L-LPS诱导J774A.1细胞凋亡率(20.54%和47.98%)明显低于未阻断细胞(62.17%,P＜0.05),ERK通路阻断后细胞凋亡率仍高达61.72%(P＞0.05).结论 L-LPS经TLR2识别后通过p38MAPK和JNK通路上调J774A.1细胞Fas和FasL表达,从而参与L-LPS诱导细胞凋亡过程。