【摘 要】
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为构建带有碱性磷酸酶活性的双功能基因工程抗体 ,用PCR方法克隆大肠杆菌碱性磷酸酶基因 ,通过酶切分析和DNA序列测定核实后 ,将其重组到抗乙肝表面抗原 (HBsAg)Fab段的Fd羧
【机 构】
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海军总医院中心实验室!北京100037;
【基金项目】
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国家科委863基金! (86 3 10 2 12 0 8);军队重点课题基金! (96Z0 0 4)
论文部分内容阅读
为构建带有碱性磷酸酶活性的双功能基因工程抗体 ,用PCR方法克隆大肠杆菌碱性磷酸酶基因 ,通过酶切分析和DNA序列测定核实后 ,将其重组到抗乙肝表面抗原 (HBsAg)Fab段的Fd羧基端 ,构建重组融合蛋白表达载体pHBFAP ,转化大肠杆菌XL1 Blue ,经异丙基硫代 β D 半乳糖苷诱导表达后 ,采用ELISA法检测到培养上清中存在与HBsAg的结合活性和碱性磷酸酶的催化活性 ,显示抗HBsAg 碱性磷酸酶双功能抗体分子在大肠杆菌中获得了表达 .
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