探讨抗程序性死亡配体1(PD－L1)单抗和表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR－TKI)对EGFR敏感突变肺癌细胞中细胞膜型和可溶性PD－L1表达以及T细胞功能的影响。
方法采用流式细胞术和酶联免疫吸附法(ELISA)检测厄洛替尼干预前后EGFR突变及野生型肺癌细胞株中细胞膜型PD－L1和可溶性PD－L1的表达。以抗PD－L1单抗和(或)厄洛替尼处理肿瘤细胞和T细胞，采用细胞计数盒8(CCK－8)法检测共培养体系中T细胞增殖的变化；采用流式细胞术检测厄洛替尼干预后共培养体系中肿瘤细胞和T细胞中细胞膜型PD－L1的表达变化；采用ELISA法检测γ干扰素(IFN－γ)的水平。
结果EGFR敏感突变型细胞株PC9和HCC827中高表达细胞膜型PD－L1，其表达率分别为(78.7±3.1)%和(82.7±2.6)%。经厄洛替尼处理后，PC9和HCC827细胞中细胞膜型PD－L1的表达率分别为(64.7±3.1)%和(73.0±2.6)%，均明显下调(均P<0.05)；PC9和HCC827细胞培养液上清中可溶性PD－L1的含量分别为(0.680±0.120)ng/ml和(0.903±0.047)ng/ml，均明显降低(均P<0.05)；而EGFR野生型细胞株A549和H1299中细胞膜型PD－L1和可溶性PD－L1的表达均无明显变化。在EGFR突变型肺癌细胞共培养体系中，厄洛替尼干预可促进T细胞的增殖；联合抗PD－L1单抗后，T细胞的增殖能力更加增强(均P<0.05)。在EGFR野生型肺癌细胞共培养体系中，厄洛替尼干预对T细胞的增殖无明显影响(均P>0.05)；联合抗PD－L1单抗后，T细胞的增殖能力亦无明显变化(均P>0.05)。厄洛替尼干预前后，活化T细胞和HCC827细胞共培养组中IFN－γ的分泌水平分别为(856.0±70.3)pg/ml和(1 697.3±161.0)pg/ml，差异有统计学意义(P<0.001)；细胞膜型PD－L1的表达率分别为(76.2±0.5)%和(50.9±0.9)%，差异亦有统计学意义(P<0.001)。厄洛替尼干预并不能引起活化T细胞和A549细胞共培养组中IFN－γ和细胞膜型PD－L1的表达变化。
结论抗PD－L1单抗联合EGFR－TKI可促进EGFR敏感突变肺癌细胞微环境中T细胞的增殖和分泌功能。