【摘 要】
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以冷水性虹鳟鱼抗凝冷冻全血为材料,分别采用氯仿-醋酸钾法、RGDE(Rapid genomic DNA extraction)法、改进的RGDE法、传统酚-氯仿法、试剂盒法提取基因组DNA,琼脂糖凝胶电泳
【基金项目】
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甘肃省自然科学基金(No.0803RJZA030)资助
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以冷水性虹鳟鱼抗凝冷冻全血为材料,分别采用氯仿-醋酸钾法、RGDE(Rapid genomic DNA extraction)法、改进的RGDE法、传统酚-氯仿法、试剂盒法提取基因组DNA,琼脂糖凝胶电泳检测显示改进的RGDE法可以获得较高质量的鱼类基因组DNA。进一步将改进的RGDE法提取血液基因组DNA的效果与传统酚-氯仿法提取血液、肌肉基因组DNA及试剂盒法提取血液基因组DNA的效果通过紫外分光光度计测定浓度和纯度进行比较。结果表明,改进RGDE法提取的基因组DNA平均浓度为1050ng/μL,极显著高于用试剂盒从血液中提取的DNA浓度,显著高于酚-氯仿法从血液和肌肉中提取的DNA浓度,DNA产量为1575μg/mL,A260/A280比值1.65~1.97。采用改进的RGDE法提取DNA,全过程只需2h,具有速度快、成本低、无污染、无需特殊设备的明显优点,而且随机扩增的结果稳定,电泳条带清晰。
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