固相萃取Folin–Ciocalteu比色法测定尿液中总酚含量

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目的

建立Folin–Ciocalteu比色法测定尿液中总酚的方法。

方法

方法学建立。2013年12月至2014年4月选取北京医院123名健康志愿者,年龄18~81岁,男52名,女71名。尿液样本收集后加入终浓度0.5% HCl,分装,–80 ℃保存;尿样用Plexa PAX固相萃取柱进行提取纯化、洗脱液用氮气吹干后重组;Folin–Ciocalteu试剂显色,紫外分光光度计测定吸光度;没食子酸标准曲线计算尿总酚浓度,结果用尿肌酐进行校正。测定尿总酚浓度,分析总酚与血脂等心血管病危险因素的关系。相关性比较采用Spearman相关性分析。

结果

没食子酸标准溶液和尿液样本在0.5%HCl、避光条件下在室温可稳定48 h、4 ℃稳定7 d。Plexa PAX固相萃取柱对主要的多酚类物质有较好的回收率,并能有效去除维生素C、有机酸等物质的干扰。PAX抽提、Folin–Ciocalteu比色法测定尿液中总酚的平均批内变异和总变异分别为2.7%~3.8%和2.4%~4.6%。123名健康志愿者尿液中总酚浓度为114.13(82.97~146.70) mg GAE/g Crea。尿总酚与HDL–C(r=0.194, P=0.032)和apoAI(r=0.312,P<0.001)呈正相关,与血尿酸(r=–0.220,P=0.014)呈负相关。

结论

成功建立了Folin–Ciocalteu比色法测定尿液中总酚的方法,方法精密、可靠,可用于评价多酚类物质的摄入水平。(中华检验医学杂志201538178–182)

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