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目的
观察微小RNA(miRNA,miR)-93靶向大型肿瘤抑制因子2(LATS2)对肾癌细胞GRC-1增殖及凋亡的影响。
方法选取人肾癌细胞GRC-1,双荧光素酶报告基因实验验证miR-93与LATS2的靶向关系。分别转染Neg-miR、pre-miR-93、anti-miR-93至肾癌细胞GRC-1,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测miR-93表达,Western blot检测LATS2蛋白表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡。
结果miR-93与LATS2存在结合位点。与转染Neg-miR比较,共转染pre-miR-93与LATS2-wt可使GRC-1荧光素酶活性降低(P=0.000)。与Neg-miR组比较,pre-miR-93组miR-93表达上调,LATS2蛋白表达降低(P=0.000);anti-miR-93组miR-93表达降低,LATS2蛋白表达增高(P=0.000)。与Neg-miR组比较,pre-miR-93组细胞增殖活性增高,同时凋亡率降低(P=0.000);anti-miR-93组细胞增殖活性降低,同时凋亡率增高(P=0.000)。
结论miR-93可通过靶向LATS2调控肾癌细胞增殖及凋亡。