检测应激诱导磷酸化蛋白1(STIP1)和GATA5在结肠癌细胞中的表达，探讨STIP1通过调节GATA5的表达在结肠癌细胞增殖、侵袭及迁移过程中的作用及机制。
方法实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测正常结肠(NCM460)和结肠癌(HCT116)2种细胞中STIP1、GATA5的mRNA及蛋白的表达。转染STIP1过表达载体和siRNA感染序列至HCT116细胞，实验分为3组，过表达转染组、阴性转染对照组、抑制组。Western blot检测STIP1、GATA5和β-连环蛋白(β-catenin)的表达。细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell小室迁移实验和Matrigel侵袭实验检测细胞增殖、迁移及侵袭能力。采用t检验进行比较。
结果STIP1 mRNA和蛋白在HCT116的相对表达量分别为1.703±0.068、1.954±0.081，明显高于NCM460(1.000±0.000、1.000±0.000，t＝17.78、20.236，P<0.01)。GATA5 mRNA和蛋白在HCT116的相对表达量分别为0.774±0.026、0.646±0.048，明显低于NCM460(1.000±0.000、1.000±0.000，t＝14.76、12.673，P<0.01)。转染STIP1过表达载体后GATA5 mRNA和蛋白的相对表达量(0.534±0.065、0.742±0.058)明显低于对照组(1.000±0.000、1.000±0.000，t＝12.27、7.621，P<0.01)。转染48 h和72 h后细胞增殖水平明显高于对照组(1.268±0.078比0.891±0.025，t＝7.918，P<0.01；1.873±0.058比1.446±0.055，t＝9.138，P<0.01)；侵袭和迁移细胞数[(123.3±14.7)、(141.4±14.2)个]明显高于对照组[(94.9±14.2)、(100.8±12.1)个，t＝4.369、6.852，P<0.01]；β-catenin的表达(1.316±0.054)明显高于对照组(1.000±0.000，t＝10.013，P<0.01]。转染STIP1 siRNA感染序列后GATA5 mRNA和蛋白的相对表达量(1.386±0.038、1.465±0.070)明显高于对照组(1.000±0.000、1.000±0.000，t＝17.595、11.503，P<0.01)。转染72 h后细胞增殖水平(1.254±0.102)明显低于对照组(1.589±0.041，t＝-5.243，P<0.01)；侵袭和迁移细胞数[(60.8±8.7)、(77.0±7.9)个]明显低于对照组[(91.7±8.3)、(108.8±9.3)个，t＝-8.088、-8.182，P<0.01]；β-catenin的表达(0.741±0.046)明显低于转染对照组(1.000±0.000，t＝-9.677，P<0.05)。
结论STIP1调控GATA5表达促进结肠癌细胞增殖、侵袭及迁移，该过程可能和Wnt/β-catenin信号通路相关。