目的研究藏红花酸（CRO）对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,探讨其与丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（Akt）/糖原合成酶激酶（GSK）-3β/一氧化氮合酶（eNOS）信号通路的关系。方法 SD大鼠40只,随机数字表法均分为正常（N）组、缺血再灌注（IR）组及5、10、15 mg/L加药（CRO₁、CRO₂、CRO₃）组,比较再灌注30 min时各组心率（HR）,冠脉流量（CF）,左心室内压测定（LVDP、LV+dp/dtmax、LV-dp/dtmax）。灌流结束TTC心肌染色评估梗死范围,分光光度法测定肌浆乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶（CK-MB）;Western blot检测各组心肌组织内Akt、磷酸化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（p-Akt）、GSK-3β、磷酸化的糖原合成酶激酶（p-GSK）-3β、eNOS、磷酸化的一氧化氮合酶（p-NOS）。结果 IR组再灌注30 min时HR、CF、LVDP、LV+dp/dtmax、LV-dp/dtmax较N组及加药组降低,心肌梗死面积较加药组增大,LDH、CK-MB表达较N组及加药组增加（均P<0.05）,CRO₃组再灌注指标较CRO₁组升高,梗死面积降低,LDH、CK-MB表达减少（P<0.05）。IR组Akt、GSK-3b及eNOS较N组及加药组的表达差异无统计学意义,但p-Akt、p-GSK-3β及p-NOS与N组及加药组降低,且CRO₃组较CRO₁组增加（均P<0.05）。结论藏红花酸能够减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其作用机制可能与激活Akt/GSK-3β/eNOS通路并影响其磷酸化水平有关。