目的:利用RNAi技术探讨P21蛋白表达对HeLa细胞周期解耦联和细胞凋亡的影响。方法:丝裂霉素刺激HeLa细胞后可诱导P21蛋白高表达,采用脂质体转染技术将p21 siRNA载体转染至HeLa细胞48 h后给予MMC刺激,利用流式细胞术检测HeLa细胞的P21蛋白表达、细胞倍体的形成和细胞凋亡的改变。结果:p21siRNA载体可有效干扰经MMC诱导的HeLa细胞中P21蛋白表达,MMC刺激后24 h和48 h细胞2倍体百分数明显少于对照组(P<0.01),4倍体和8倍体细胞百分数明显多于对照组(P<0.01)。p21 siRNA沉默HeLa细胞p21后,凋亡细胞百分率明显高于空质粒对照组(P<0.01)。结论:p21 siRNA可有效沉默HeLa细胞P21蛋白表达,在P21蛋白低表达的情况下,HeLa细胞可通过p53非依赖途径诱导细胞死亡,可能与细胞周期解偶联和p53非依赖的细胞凋亡有关。