工程菌P．pastorisGS115（pPIC9K—lac2）的构建及诱导表达漆酶的研究

来源 :工业微生物 | 被引量 : 0次 | 上传用户：midou2000

【摘要】

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用PCR法扩增枯草芽孢杆菌的漆酶基因lac2。构建表达质粒pPIC9K-lac2。通过电转法将lac2基因重组于P．pastoris基因组，筛选高G418抗性和高表达漆酶的转化子作为工程菌GS115（pPIC9K

【作者】

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沈锦城张泽华杨穗珊张添元罗进贤张爱联

【机构】

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海南大学农学院,中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物技术重点开放实验室,中山大学基因工程教育部重点实验室生物化学系

【出处】

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工业微生物

【发表日期】

：

2013年1期

【关键词】

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漆酶枯草芽孢杆菌基因表达 P PASTORIS 发酵高密度发酵 laccase Bacillus subtilis gene expression P

【基金项目】

：

中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助项目（ITBB120503）.

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用PCR法扩增枯草芽孢杆菌的漆酶基因lac2。构建表达质粒pPIC9K-lac2。通过电转法将lac2基因重组于P．pastoris基因组，筛选高G418抗性和高表达漆酶的转化子作为工程菌GS115（pPIC9K—lac2）。在发酵罐中发酵GSll5（pPIC9K—lac2）表达重组蛋白。在50L发酵罐中加入20L无机盐发酵培养基。在发酵的第一阶段连续24h补加50％甘油-0．8％PTM4增殖P．pastoris，然后用甲醇-0．8％PTM4诱导49h。在发酵过程中，通过调节搅拌的频率和通气量，将溶氧维持

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