【摘 要】
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介绍了一种制备海洋浮游生物PCR模板DNA的方法--碱煮法.取少量海水样品(40 μL),直接经0.25 mol/LNaOH和99℃温育处理裂解细胞,从而得到环境样品总DNA.实验证明,该方法制备的
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介绍了一种制备海洋浮游生物PCR模板DNA的方法--碱煮法.取少量海水样品(40 μL),直接经0.25 mol/LNaOH和99℃温育处理裂解细胞,从而得到环境样品总DNA.实验证明,该方法制备的模板DNA可用于细菌核糖体RNA、浮游植物叶绿体rbcL和浮游动物线粒体COI等基因的PCR扩增.但是,在使用通用引物扩增细菌基因时,假阳性很难避免.该法制备的模板DNA适用于扩增非细菌基因或者特异引物界定的细菌基因.该方法较传统制备方法快速、简便,样品需要量减少,适用于浮游生物分子遗传多样性研究.
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