【摘 要】
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硫酸软骨素酶ABCⅠ (ChSase ABCⅠ)是一类能够将硫酸软骨素、软骨素、透明质酸等糖胺多糖降解为寡糖及不饱和二糖的裂解酶.该研究将硫酸软骨素酶ABC Ⅰ基因与麦芽糖结合蛋白(
【机 构】
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"北京电子科技职业学院生物工程学院,北京100176;北京理工大学生命学院,北京100081;
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硫酸软骨素酶ABCⅠ (ChSase ABCⅠ)是一类能够将硫酸软骨素、软骨素、透明质酸等糖胺多糖降解为寡糖及不饱和二糖的裂解酶.该研究将硫酸软骨素酶ABC Ⅰ基因与麦芽糖结合蛋白(MBP)基因分别用FFFFF和RRRRR两种连接肽连接,并克隆到pMAL-c2X载体上,在大肠杆菌(Escherichia coli) BL21 (DE3)高效表达.结果 表明,重组酶MBP-FFFFF-ChSase ABCⅠ的酶活和比酶活分别为716.5 IU/L发酵液和1.15 IU/mg蛋白,重组酶MBP-RRRRR-ChSase ABCⅠ的酶活和比酶活分别为741.0 IU/L发酵液和1.13 IU/mg蛋白.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明,重组酶MBP-FFFFF-ChSase ABC I和MBP-RRRRR-ChSase ABC Ⅰ的分子质量均为130kDa,并且都为可溶性蛋白.
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