【摘 要】
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目的观察和分析大脑皮质细胞低氧条件液对神经干细胞增殖的影响,并探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)两条信号通路在此过程中的作用。方法原代培养出生后
【机 构】
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上海体育学院运动科学学院运动生化与营养学教研室,上海体育学院运动健身科技教育部重点实验室,
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目的观察和分析大脑皮质细胞低氧条件液对神经干细胞增殖的影响,并探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)两条信号通路在此过程中的作用。方法原代培养出生后24 h内SD大鼠大脑皮质细胞5 d后,全量换液并在4%O2、1%O2和常氧环境下继续培养细胞6 h以制备低氧条件液和常氧条件液。分别用3种条件液及结合使用PI3-K、JNK信号通路抑制剂LY294002和SP600125悬浮培养神经干细胞,并用免疫荧光染色鉴定神经干细胞,使用增殖效率(神经球数量)和增殖速度(神经球直径)分析神经干细胞的增殖情况。结果 (1)4%低氧条件液组和常氧条件液组神经干细胞的增殖效率高于1%低氧条件液组(P<0.01),但前两者之间差异无统计学意义;(2)与常氧条件液相比,两个低氧条件液均提高了神经干细胞的增殖速度(P<0.01),且4%低氧条件液组神经干细胞的增殖速度较1%低氧条件液组快(P<0.01);(3)在4%低氧条件液中使用LY294002和SP600125同时抑制了神经干细胞的增殖效率和增殖速度,且LY294002抑制作用在24 h之后尤为明显。结论4%大脑皮质细胞低氧条件液能提高神经干细胞的增殖速度,PI3-K信号通路在此过程中发挥主要作用。
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