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目的：制备和鉴定人卵巢癌cDNA文库筛选到的肿瘤相关抗原OVA66的单克隆抗体,为研究其生物学功能提供手段。方法：采用基因重组方法构建pET32b-OVA66重组表达质粒,经大肠杆菌诱导表达OVA66融合蛋白,利用Ni-TED亲和层析技术分离纯化His-OVA66融合蛋白;采用经典的杂交瘤技术制备OVA66单克隆抗体;ELISA和Western blotting鉴定单克隆抗体的生物学和免疫学特性,并对OVA66单克隆抗体在细胞免疫荧光法、流式细胞术和免疫组化等方法中进行了初步应用。结果：成功构建重组表达载