小鼠高迁移率族蛋白1cDNA克隆、原核表达与鉴定

来源 :江苏大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wxj1234567
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目的:克隆并原核表达小鼠高迁移率族蛋白1(high mobility group box1,HMGB1)。方法:从小鼠脾脏细胞中提取总RNA,应用RT-PCR获得小鼠HMGB1cDNA,经PCR扩增小鼠HMGB1基因;通过T-A克隆将该基因构建到PMD-18T载体中,测序鉴定;将该基因插入pET-28a(+)表达载体,IPTG诱导后,可表达相对分子质量约30 kDa的蛋白。蛋白质印迹鉴定表达的目的蛋白。结果:经RT-PCR扩增得到648 bp的DNA片段,序列分析显示与基因库中报道的已知序列完全一致;构建
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