为测定半夏及其炮制品中内源性毒性物质半夏凝集素蛋白（Pinellia ternata lectin protein，PTL）的含量，本文采用杂交瘤细胞技术制备PTL特异性单克隆抗体，并建立了PTL抗原定量双抗夹心ELISA检测方法，检测条件为：捕获抗体工作浓度为2.5 μg·mL-1，检测抗体稀释倍数为1:450，包被条件为4 ℃过夜，封闭时间、抗原及检测抗体孵育时间均为90 min，辣根过氧化物酶标记链霉亲和素（streptavidin-horseradish peroxidase，SA-HRP）孵育时间为15 min。该方法对PTL抗原的定量限为0.375 ng·mL-1；线性范围为75.000～4 800.000 pg·mL-1，R2=0.9971；加样回收率在90.0%～110.0%；试验内和试验间精密性变异系数分别在2.0%～3.0%、2.0%～8.5%。采用该方法测定3批半夏及其炮制品中PTL含量，测得半夏中PTL质量分数均值为35.42 mg·g-1，其炮制品清半夏、法半夏、姜半夏中PTL质量分数均值分别为1.15 mg·g-1、16.53 μg·g-1和122.63 ng·g-1，表明炮制后PTL含量显著下降。本文建立的PTL抗原定量双抗夹心ELISA检测方法线性较好，反应灵敏，准确度高，为半夏炮制过程中PTL含量检测提供一种简便有效的监测方法。