【摘 要】
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目的 观察茯苓酸(PA)对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞活化的影响以及对LPS诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠的保护作用,并探讨其作用机制.方法 体外培养小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7和原代肺巨噬细胞,使用40μmol/L PA孵育30 min后,以100 ng/mL的LPS刺激24 h.将36只健康C57BL/6小鼠随机均分为Control组、LPS组和LPS+PA组,每组12只,采用经气管内滴入5 mg/kg的LPS诱导ALI模型.收集处理后的细胞、细胞培养上清液或小鼠肺组织,使用RT-PCR法检测
【机 构】
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衡水市第四人民医院儿科,河北衡水053000;衡水市人民医院小儿内科,河北衡水053000;衡水市第四人民医院药剂科,河北衡水053000
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目的 观察茯苓酸(PA)对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞活化的影响以及对LPS诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠的保护作用,并探讨其作用机制.方法 体外培养小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7和原代肺巨噬细胞,使用40μmol/L PA孵育30 min后,以100 ng/mL的LPS刺激24 h.将36只健康C57BL/6小鼠随机均分为Control组、LPS组和LPS+PA组,每组12只,采用经气管内滴入5 mg/kg的LPS诱导ALI模型.收集处理后的细胞、细胞培养上清液或小鼠肺组织,使用RT-PCR法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)、白介素12(IL-12)mRNA水平;比色法检测一氧化氮(NO)水平及髓过氧化物酶(MPO)活性;采用HE染色观察小鼠肺组织病理变化;Western blot检测p38、p-p38、MK2、p-MK2、Akt、p-Akt、p65、p-p65蛋白表达.结果 体外实验中,PA显著抑制LPS刺激的RAW264.7和肺巨噬细胞促炎介质(iNOS、NO)以及炎症细胞因子(TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-12)生成(P<0.01),抑制细胞中p38、MK2、Akt和NF-κB(p65)蛋白的磷酸化(P<0.05).体内实验中,PA显著抑制LPS诱导的小鼠肺组织病理损伤(P<0.05),减少肺组织中促炎介质iNOS以及炎症细胞因子(TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-12)生成(P<0.01),抑制肺组织中p38、MK2、Akt和NF-κB(p65)蛋白的磷酸化(P<0.05).结论 PA能抑制LPS诱导的巨噬细胞活化和炎症反应,并对LPS诱导的ALI小鼠具有保护作用,其机制与抑制丝裂原活化蛋白激酶p38(p38 MAPK)和Akt介导的NF-κB信号通路激活相关.
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