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根据布鲁菌属特异性基因BCSP31和布鲁菌种间特异性标志IS711插入序列，设计合成3对引物，以牛种布鲁菌A19，羊种M5，猪种s2基因组DNA为模版，建立可同时检测布鲁菌属、牛种布鲁菌和羊种布鲁菌的多重PCR方法，并对方法的扩增效果、特异性、敏感性及适用性进行验证。结果显示，牛种布鲁菌可扩增出222bp和615bp两条带，羊种布鲁菌可扩增出222bp和932bp两条带，该方法对牛种布鲁菌A19和羊种布鲁菌M5混合DNA模板的最小检出量为100pg，对葡萄球菌26001株、大肠杆菌O78等7种参照菌的核酸