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目的建立制霉菌素鱼肝油乳剂的制备与含量测定方法。方法取羧甲基纤维素钠0．5g，用纯化水24mL充分溶胀，待初乳形成后分次加入制霉菌素原料药3g混匀，加入1g吐温-80。缓缓滴加鱼肝油，边加边搅拌，至100g全量即得制霉菌素鱼肝油乳剂。采用紫外分光光度法测定其含量，检测波长为291nm。结果紫外分光光度法测定制霉菌素，线性范围为6．98～16．30μg·mL^-1，r=0．9994，平均回收率100．75％，RSD=0．87％。结论该方法可用于制霉菌素鱼肝油乳剂的制备与质量控制。