【摘 要】
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目的 探讨二甲双胍对人结肠癌HT29细胞增殖、凋亡的影响及可能机制.方法 体外培养人结肠癌细胞株HT29,随机分为2组,二甲双胍干预组采用5,10,20及40 mmol/L的二甲双胍进行干预
【机 构】
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华北理工大学 附属医院普通外科,唐山,063000
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目的 探讨二甲双胍对人结肠癌HT29细胞增殖、凋亡的影响及可能机制.方法 体外培养人结肠癌细胞株HT29,随机分为2组,二甲双胍干预组采用5,10,20及40 mmol/L的二甲双胍进行干预,对照组加入等量PBS液,干预24,48及72 h后用MTT法检测细胞的增殖情况.二甲双胍干预组HT29细胞在上述各浓度的二甲双胍干预24 h后,于光镜下观察形态学改变;40 mmol/L的二甲双胍干预48 h后,行AnnexinV-FITC和PI染色,并采用流式细胞术检测分析凋亡情况.二甲双胍干预组二甲双胍干预浓度为5及40 mmol/L,对照组加入等量 PBS 液,干预 48 h,Western-blot 法检测 PI3K, AKT,P-AKT,GSK-3β 及 P-GSK-3β 蛋白的表达.结果 二甲双胍可抑制结肠癌HT29细胞的增殖,并呈时间-剂量依赖性,各组间抑制率差别有统计学意义(P均<0.05).光镜下可见细胞数目减少,由多边形变为圆形,体积缩小,核固缩,细胞核溶解,且随着二甲双胍浓度的增高,细胞凋亡比例升高.流式实验结果 显示,干预48 h的二甲双胍干预组凋亡率大于对照组(P<0. 05).Western-blot检测结果 显示,二甲双胍可抑制HT29细胞的PI3K,P-AKT及P-GSK-3β蛋白表达量,且呈浓度依赖性,而对AKT及 GSK-3β蛋白表达量无明显影响.结论 二甲双胍可抑制人结肠癌HT29细胞的增殖能力并促进细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/AKT/GSK-3β通路相关蛋白的表达有关.
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