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采用基因插入失活的方法，将1．5kb安普霉素抗性基因插入1．8kb aveF基因内部SalI位点，构建重组质粒pPC-5，并转化除虫链霉菌D2—14，获得基因工程菌株AV—F1。经HPLC分析，发现该菌株主要产生两个组分，分别为5-酮avermectin 1a和5-酮avermectin 2a，还产生一个小组分为acermectin Bla。5-酮avermectin基因工程菌株的构建成功，为化学合成新的avermectin衍生物提供了可利用的原料来源。