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目的优化利福霉素发酵摇瓶中巴比妥钠的添加量及添加策略，以提高发酵产量。方法采用摇瓶发酵，优化巴比妥钠初始含量及中间补加策略，通过测定发酵液中利福霉素B的效价及菌体浓度来确定合适的发酵工艺。结果巴比妥钠添加的优化策略为：初始浓度0．05％，72h补加至0．1％，120h补加至0．15％。结论优化工艺使发酵单位显著提高，比不加巴比妥钠提高17％，比目前生产水平提高10％以上。