实时定量RT‐PCR检测慢性淋巴细胞白血病正调节基因1表达及临床意义

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目的 研究慢性淋巴细胞白血病(CLL)正调节基因1(CLLU1)在CLL患者的表达特征,探讨CLLU1在CLL预后中的意义。方法 采用实时定量RT-PCR(qRT-PCR)检测41例CLL患者外周血标本CLLU1的表达。以3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)为内参、2(-ΔCt)方法计算CLLU1的相对定量值。组间对比采用秩和检验,Spearman相关分析CLLU1表达水平与性别、年龄、临床分期、IgVH基因突变、CD38和ZAP-70蛋白的关系。结果 qRT-PCR标准曲线相关系数R值均>0.99,敏感度可以检测到102个拷贝/μgRNA,批内差、批间差分析结果其变异系数(CV)均<5%。41例患者CLLU1表达水平中位数为0.139(0~5256.912)。CLLU1表达水平与临床分期、IgVH基因突变、CD38密切相关,BinetB+C期患者CLLU1表达水平明显高于BinetA期患者(P=0.040),无IgVH突变患者的CLLU1表达水平高于IgVH突变患者(P=0.021),CD38阳性患者中CLLU1表达水平较阴性者高(P=0.045)。结论 采用qRT-PCR方法检测CLLU1表达敏感可靠。CLLU1表达水平与CLL临床分期和重要预后因素IgVH基因突变及CD38密切相关,并可较准确地预测IgVH突变情况,在CLL的预后中具有重要价值。

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