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初步探讨靶向碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的小分子干扰RNA(siRNA)诱导胶质瘤U251细胞凋亡的作用机制。
方法将U251细胞分为对照组、空载组和实验组,空载组和实验组按感染复数(MOI)=100分别进行空载体腺病毒(Ad-null)和含有bFGF小分子干扰RNA的重组腺病毒(Ad-bFGF-siRNA)转染,转染72 h后通过Western blot方法检测相关蛋白的表达,并应用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位的变化,多组间均数比较采用单因素方差分析(One-way ANOVA)。
结果实验组细胞经转染Ad-bFGF-siRNA 72 h后,Western blot结果显示,与对照组和空载组相比bFGF蛋白表达明显降低,同时Cytochrome C、Caspase-3及Bax凋亡相关蛋白的表达增强,Bcl-xl和Bcl-2蛋白的表达降低;经流式细胞仪检测,线粒体膜电位高的细胞所占的比例实验组为74.4%±4.7%与对照组的92.1%±2.5%、空载组的90.9%±1.8%相比明显下降,差异有统计学意义(F=28.805,P<0.05);激光共聚焦显微镜的结果显示实验组的红色荧光与绿色荧光的比值为0.83 ±0.12与对照组的1.36±0.40和空载组的1.32±0.35相比明显下降,差异具有统计学意义(F=7.920,P<0.05)。
结论靶向bFGF的siRNA可能通过线粒体途径诱导胶质瘤U251细胞凋亡。