梅山猪LH—β基因真核表达系统的构建及体内外转染表达效果的研究

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chaofree900521
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将克隆的梅山猪LH-β基因亚克隆到真核表达型载体VR1020上,通过质粒PCR的方法在转化子中筛选阳性克隆,用BamH Ⅰ、BglⅡ双酶切鉴定重组子.得到的重组真核表达质粒转染Cos7细胞株,RT-PCR检测猪LH-β表达情况.然后用VPLH-β质粒、VR1020分别肌肉注射小鼠,研究了小鼠的生殖特性情况.结果显示:通过质粒PCR和双酶切分析,得到猪LH-β基因以正确方向插入的重组真核表达质粒VPLH-β.重组质粒VPLH-β经脂质体介导转染Cos7细胞,培养不同时间后提取mRNA进行RT-PCR,发现转
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