清热明目颗粒对实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠的治疗作用及抗炎机制研究

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目的 探讨清热明目颗粒对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)大鼠的治疗作用以及对炎症细胞因子表达的影响.方法 24只Lewis大鼠随机分为空白组、EAU组、实验组,雷公藤组4组,每组各6只.利用光感受器间维生素A结合蛋白(IRBP)免疫大鼠制作EAU模型,空白组注射等量不含IRBP的乳化液.于免疫的同时,实验组给予3.5 g/(kg·d)清热明目颗粒悬浊液灌胃;雷公藤组给予6.8 μg/(kg·d)含雷公藤甲素的悬浊液灌胃;空白组和EAU组给予同等剂量蒸馏水灌胃.各组给药均为每日1次,连续7d.各组大鼠在炎症高峰期(第15d)摘取眼球制备视网膜切片,根据Caspi组织学分级法评分,分离各组大鼠脾脏和腹部淋巴结淋巴细胞,采用ELISA法检测IL-2、IL-10、IL-17、IFN-γ表达水平.结果 (1)炎症评分:EAU组、实验组和雷公藤组均于免疫后8d开始发病,EAU组炎症反应评分明显增高,与空白组差异有统计学意义(t =49.019,P=0.000),而实验组和雷公藤组与空白组差异无统计学意义.免疫第10d,各组炎症反应均升高,与空白组差异均有统计学意义(tEAU组=7.904,P=0.000,t实验组=3.980,P=0.001,t雷公藤组组=7.250,P=0.000),而实验组评分低于EAU组(t=3.925,P =0.001)和雷公藤组(t=3.271,P=0.004),差异有统计学意义.免疫第15 d,各组炎症反应达高峰,实验组评分低于EAU组(t=7.071,P=0.000),差异有统计学意义.(2)组织病理学:实验组视网膜有炎症细胞浸润和结构破坏较轻,组织病理学评分低于EAU组(t=10.675,P=0.000),和雷公藤组(t=5.115,P=0.000),差异有统计学意义.(3)炎性细胞因子:EAU组淋巴细胞培养上清液IL-2、IL-17、IFN-γ表达升高,IL-10表达降低(FIL-2=912.986,FIL-17=103.286,F INF-γ=1852.132,FIL-10=291.765,均P=0.000),均有统计学意义;与EAU组比较,淋巴细胞培养上清液IL-2、IL-17、IFN-γ表达量在实验组(tIL-2=31.041,tIL-17=7.369,tINF-γ=16.363,均P=0.000)和雷公藤组(tIL-2=17.137,t IL-17=8.239,t INF-γ=5.037,均P=0.000)均降低,IL-10表达量在实验组(t=29.362,P=0.000)和雷公藤组(t=11.566,P=0.000)均升高,差异均有统计学意义;与雷公藤组相比,实验组IL-2、IFN-γ、IL-17表达量低,差异有统计学意义(tIL-2=30.373,tINF-γ=11.327,均P =0.000;tIL-17=2.918,P=0.015),而IL-10表达量高,差异有统计学意义(t=17.796,P=0.000).结论 清热明目颗粒能对EAU具有良好的抗炎作用,强度优于雷公藤片,其作用机制可能与抑制IL-2、IL-17、IFN-γ相关炎症因子的分泌,促进IL-10的分泌,调节细胞免疫有关.
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