【摘 要】
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目的 探讨孕期PM2.5暴露导致子代小鼠大脑发生氧化应激损伤以及维生素B的保护作用.方法 将妊娠ICR小鼠随机分为对照组、模型组和干预组,每组12只,模型组雾化吸入2.0736μg/μl的50μl PM2.5悬液+PBS灌胃,干预组雾化吸入等量PM2.5悬液+B族维生素混合液灌胃[叶酸、维生素B6、维生素B12分别为0.6、11.4、0.2 mg/(kg·d)],对照组雾化吸入等量PBS+灌胃PBS;从孕期第1天开始,每3 d进行1次雾化,每天进行灌胃,共灌胃18次、雾化6次.子代小鼠发育到第6周,分离大
【机 构】
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潍坊医学院组织学与胚胎学教研室山东省神经疾病与再生修复重点实验室,山东潍坊261053;潍坊医学院康复医学院;潍坊市妇幼保健院生殖健康科
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目的 探讨孕期PM2.5暴露导致子代小鼠大脑发生氧化应激损伤以及维生素B的保护作用.方法 将妊娠ICR小鼠随机分为对照组、模型组和干预组,每组12只,模型组雾化吸入2.0736μg/μl的50μl PM2.5悬液+PBS灌胃,干预组雾化吸入等量PM2.5悬液+B族维生素混合液灌胃[叶酸、维生素B6、维生素B12分别为0.6、11.4、0.2 mg/(kg·d)],对照组雾化吸入等量PBS+灌胃PBS;从孕期第1天开始,每3 d进行1次雾化,每天进行灌胃,共灌胃18次、雾化6次.子代小鼠发育到第6周,分离大脑皮层检测脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,以qRT-PCR、ELISA法检测炎症因子NF-κB、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)和细胞因子干扰素γ(IFN-γ)水平,以qRT-PCR、Western blot法检测凋亡相关基因caspase-3、cleaved caspase-3水平,以GFAP免疫荧光法检测星形胶质细胞,以TUNEL染色法检测细胞凋亡情况,以透射电镜观察神经元线粒体及突触的超微结构.结果 与对照组比较,模型组子代小鼠大脑皮层MDA水平升高,SOD、GSH、GSH-Px水平降低,NF-κB、TNF-α、IFN-γ、IL-1β的mRNA及蛋白表达水平均升高,星形胶质细胞GFAP免疫反应阳性细胞数增加,cleaved caspase-3蛋白表达增加,TUNEL免疫反应阳性细胞数增加,神经元线粒体肿胀、突触功能受损,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).与模型组比较,干预组子代小鼠大脑皮层MDA水平降低,SOD、GSH、GSH-Px水平升高,NF-κB、TNF-α、IFN-γ、IL-1β的mRNA及蛋白表达水平均降低,GFAP阳性细胞数减少,cleaved caspase-3和TUNEL免疫反应阳性细胞数降低,神经元和突触功能好转,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 孕期PM2.5暴露引起的大脑皮层过氧化损伤可以持续到子代小鼠青春期,若孕期同时补充维生素B可能对PM2.5所致子代小鼠脑损伤起到拮抗作用.
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