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明确新生儿疾病筛查滤纸干血片打孔部位对切值附近实验检测结果的影响。分别收集促甲状腺激素(TSH)、17α-羟孕酮(17α-OHP)、苯丙氨酸(Phe)及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)浓度在切值附近的假阳性血片各32例,分别行中央、中央至边缘1/2处及边缘打孔。采用时间分辨荧光免疫分析法和荧光法检测血斑中TSH、17α-OHP、Phe和G6PD含量。结果采用SPSS 22.0软件进行分析。血斑中央、中央至边缘1/2处TSH和17α-OHP浓度显著低于边缘(P<0.05);Phe检测结果无显著影响(P>0.05);血斑中央、中央至边缘1/2处G6PD活性显著高于边缘(P<0.05)。滤纸干血片同一血斑不同打孔部位会对被检项目浓度在切值附近检测结果产生影响,应规范日常打孔操作以提高新生儿筛查的工作质量。