【摘 要】
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目的:构建能稳定表达HIV-1 GagPol基因的真核表达载体。方法:用PCR方法扩增HIV-1 GagPol基因,克隆入pMD18-T,然后亚克隆入真核表达质粒pcDNA3.1(-)中,将构建的重组质粒pcDNA3.1(-)/
【机 构】
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郑州大学生物工程系,吉林省四平市疾病预防控制中心
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目的:构建能稳定表达HIV-1 GagPol基因的真核表达载体。方法:用PCR方法扩增HIV-1 GagPol基因,克隆入pMD18-T,然后亚克隆入真核表达质粒pcDNA3.1(-)中,将构建的重组质粒pcDNA3.1(-)/GagPol分别瞬时和稳定转染HEK293细胞,经G418筛选,建立稳定转染GagPol基因的细胞系,并应用Western Blot方法鉴定表达产物。结果:酶切鉴定和Western Blot检测证实重组质粒pcDNA3.1(-)/GagPol构建正确,并能稳定表达HIV-1 Gag
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