【摘 要】
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为制备只包含抗体可变区片段（Fv）的MAb2-5G2单链抗体（scFv）,本研究从分泌MAb2-5G2的杂交瘤细胞中提取总RNA,反转录制备cDNA作为模板扩增重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）基因。以VH-li
【机 构】
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山东农业大学动物医学院,西北农林科技大学动物医学院
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为制备只包含抗体可变区片段（Fv）的MAb2-5G2单链抗体（scFv）,本研究从分泌MAb2-5G2的杂交瘤细胞中提取总RNA,反转录制备cDNA作为模板扩增重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）基因。以VH-linker-VL的形式通过重叠PCR制备scFv基因,构建重组表达质粒pEasy-scFv,并在大肠杆菌中获得正确表达。通过western blot和间接免疫荧光鉴定表明scFv蛋白能够被兔抗MAb2-5G2的抗体（Ab3）识别,复性后的scFv蛋白能够特异性结合Marc-145细胞。该研究结果
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