目的 探讨蓝光对人RPE细胞α1D亚基蛋白表达及分泌VEGF和bFGF的影响.方法 实验研究.培养的人RPE细胞分为对照组;光照组;光照+硝苯地平组;光照+(-)BayK8644组.分别用(2 000 ±500)lx蓝光照射6h,终止细胞培养24 h.采用酶联免疫法测定RPE细胞分泌的VEGF和bFGF;Real Time-PCR检测各组RPE细胞L型钙通道中神经内分泌亚型(α1D或CaV1.3) mRNA的表达;免疫印迹(Western blot)法检测α1D亚基的蛋白表达.各组VEGF和bFGF浓度,α1D亚基mRNA及蛋白表达比较采用方差分析,两两比较采用LSD法.α1D亚基蛋白表达量与分泌VEGF及bFGF浓度之间的关系采用相关性分析.结果 (1)4组VEGF和bFGF浓度的总体均数比较有统计学意义(F=99.441、21.310,P=0.000、0.000).光照组(3 281.51±251.73、1 346.81±62.27)与光照+(-)Bay K8644组(3 808.01±94.01、1 485.82±108.97) VEGF、bFGF浓度高于对照组(2 401.09±228.07、1 232.42±65.41),差异有统计学意义(P=0.000,0.000,0.019,0.000);光照+(-)Bay K8644组(3 808.01±94.01、1 485.82±108.97)高于光照组(3 281.51±251.73、1 346.81±62.27) (P=0.000,0.006);光照+硝苯地平组(1 927.28±143.11、1 149.39±62.99)低于光照组(3 281.51±251.73、1 346.81±62.27) (P=0.000,0.000).(2)4组α1D亚基mRNA表达总体均数比较有统计学意义(F=50.320,P=0.000).光照组(210 ±23)、光照+硝苯地平组(232±14)、光照+(-)BayK8644组(478±80)α1D mRNA的表达均高于无光照组(100±20),差异均有统计学意义(P =0.023、0.006、0.010);光照+(-)BayK8644组(478±80)高于光照组(210±23)及光照+硝苯地平组(232±14) (P =0.032、0.039).(3)4组α1D亚基蛋白表达总体均数比较有统计学意义(F=1 940.363,P=0.000).光照组(0.974 2±0.014 7)、光照+(-)Bay K8644组(0.654 9±0.005 0)α1D亚基/βactin吸光度值均高于对照组(0.503 2±0.007 5),差异有统计学意义(P=0.000,0.000);光照+(-)Bay K8644组(0.654 9±0.005 0)高于光照+硝苯地平组(0.413 9 ±0.008 8)(P =0.000).(4)蓝光照射后α1D亚基蛋白表达量与分泌VEGF浓度之间存在正相关(r =0.674,F=8.333,P=0.016),与分泌bFGF浓度之间无相关性(r=0.537,F=4.061,P=0.072).结论 L型钙通道α1D亚基参与了蓝光致RPE细胞的损伤过程,蓝光照射导致人RPE细胞α1D亚基mRNA及蛋白表达量升高,VEGF和bFGF分泌量增加,α1D亚基蛋白表达与分泌VEGF量之间呈正相关。