【摘 要】
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为研究流体剪切力对喉鳞癌细胞(Hep2)紧密连接的影响,对Hep2细胞施加1.4dyn/cm2的流体剪切力,倒置显微镜观察不同时间点细胞的形态学变化;透射电镜(TEM)观察剪切力加载和松弛
【机 构】
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四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程实验室,四川大学华西药学院,
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为研究流体剪切力对喉鳞癌细胞(Hep2)紧密连接的影响,对Hep2细胞施加1.4dyn/cm2的流体剪切力,倒置显微镜观察不同时间点细胞的形态学变化;透射电镜(TEM)观察剪切力加载和松弛后细胞胞间紧密连接的变化规律;Western blot检测紧密连接蛋白(Occludin、Claudin-5和ZO-1)的表达;共聚焦显微镜下观察Claudin-5分布及表达情况。结果表明,在流体剪切力作用下,细胞形态由多边形呈梭形变化,撤销力学刺激后,细胞呈向初始形态恢复的趋势;透射电镜观察随剪切力加载时间的增加,细胞间连接更为紧密;Western blot结果显示剪切力诱导紧密连接蛋白Occludin、Claudin-5和ZO-1的表达增加,而撤销剪切力后,其表达均呈现出显著下调;免疫荧光结果表明Claudin-5表达趋势与Western blot结果一致,静态时Claudin-5均匀分布在胞浆,加载剪切力后其分布易位于胞间,撤销力学刺激后,在胞间和胞浆区域仍有Claudin-5的表达。因此,剪切力可改变Hep2细胞形态,并且通过上调Occludin、Claudin-5和ZO-1蛋白增加细胞间的紧密连接。
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