微小RNA-384通过下调多效生长因子表达抑制胰腺癌细胞增殖及浸润

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lich1234554321
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的

观察微小RNA(miRNA,miR)-384在胰腺癌组织及癌旁组织、胰腺癌细胞株中的表达及其与胰腺癌临床病理特殊的关系及其对癌细胞株增殖、迁移等的影响,探讨其作用机制。

方法

查询生物信息预测miR-384可能靶向结合多效生长因子(PTN)的mRNA,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测2016年3月至2018年12月湖北省肿瘤医院67例胰腺癌组织标本或穿刺标本中癌及癌旁组织中miR-384及PTN的表达,用携带miR-384的腺病毒转染胰腺癌细胞株PANC-1/MIAPaCa-2,PT-PCR技术检测转染前后miR-384、PTN mRNA表达量,蛋白质印迹法(Western blot)检测转染前后PTN蛋白变化,通过噻唑蓝(MTT)比色法、Transwell小室检测转染前后PANC-1/MIAPaCa-2增殖、迁移及侵袭能力变化。应用SPSS 19.0统计软件和GraphPad Prism 8.0进行数据处理和统计分析,数据以均值±标准差(Mean±SD)表示。miR-384在癌组织和癌旁组织间表达量的比较采用配对样本的t检验。

结果

miR-384在胰腺癌组织及癌旁组织中相对表达量分别为0.003 7±0.000 9、0.006 5±0.002 2,差异有统计学意义(t=6.177,P<0.01),并与神经浸润及淋巴结转移明显相关(χ2=4.750、13.400,P<0.05)。将胰腺癌组织分为miR-384低表达组及高表达组,PTN mRNA相对表达量分别为0.073±0.028、0.045±0.001,差异有统计学意义(t=2.082,P<0.05)。转染腺病毒后,与阴性对照组比较,PANC-1细胞中miR-384表达提高11.69倍(t=28.600,P<0.01),PTN mRNA及PTN蛋白则分别降至19.02%(t=31.200,P<0.01)、38.00%(t=16.200,P<0.01),MIAPaCa-2细胞中miR-384表达提高14.95倍(t=21.300,P<0.01),PTN mRNA及PTN蛋白分别降至15.02%(t=13.300,P<0.01)、13.74%(t=13.500,P<0.01),差异有统计学意义。两种细胞株增殖、迁移、侵袭能力均下降,而重组人PTN蛋白处理可逆转此情况。

结论

miR-384在胰腺癌中具有明显抑制肿瘤作用,其机制可能是通过靶向结合PTN mRNA下调PTN表达实现。

其他文献
目的探讨急性心肌梗死(AMI)大鼠中微小RNA(miRNA,miR)-221的表达及相关机制。方法通过冠状动脉左前降支结扎大鼠来建立AMI模型,将构建成功的36只AMI大鼠随机分为AMI组、对照组及抑制组,另外设立假手术组采用冠状动脉左前降支穿线不结扎,每组12只。其中抑制组及对照组分别采用心肌组织局部注射慢病毒转染的miR-221 inhibitor及miR-221阴性对照(NC),AMI组和假
目的探讨Toll样受体4(TLR4)通路在重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤中的作用机制。方法构建TLR4基因敲除(TLR4-/-)及野生型(TLR4+/+)小鼠SAP模型。随机分为4组(n=10):A:TLR4+/+对照组;B:TLR4+/+-SAP组;C:TLR4-/-对照组;D:TLR4-/--SAP组。酶联免疫吸附法测定血清白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、I
目的检测结直肠癌(CRC)组织中受体相互作用蛋白2(RIP2)的表达,观察抑制RIP2表达后肿瘤细胞的变化,探讨RIP2在CRC侵袭迁移中发挥的作用。方法应用免疫组织化学染色(IHC)技术检测2018年1月至2018年12月在河北医科大学第四医院外二科住院手术的68例CRC肿瘤组织[其中男47例,女21例,年龄(54.06±9.18)岁]及50例癌旁正常黏膜石蜡组织中RIP2、基质金属蛋白酶(MM
目的对C57BL/6 ApoE-/-小鼠股动脉采用部分结扎的方法制作小鼠后肢动脉狭窄模型,血管造影对小鼠后肢动脉狭窄率进行评估。方法16只ApoE-/-麻醉小鼠后钝性分离出右侧股动脉,平行股动脉放置金属丝,细线同时捆绑股动脉和金属丝,结扎后抽出金属丝,缝合皮肤伤口,对侧同法处理但不结扎;高脂饮食喂养4周后处死小鼠暴露心脏,从左心室手推造影剂,放入小动物X线成像系统进行血管造影;造影后留取小鼠双侧股
目的观察姜黄素介导的光动力疗法(PDT)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)及其生物膜活性的影响。方法先用单态氧荧光探针(SOSG)验证光动力下姜黄素产生活性氧(ROS);后实验对象为MRSA悬液和MRSA生物膜,均分为姜黄素组、PDT组、姜黄素-PDT组、空白对照组4组。姜黄素组和姜黄素-PDT组分别设置不同浓度剂量组(1.00、6.25、12.50、25.00 μmol/L)。PDT处理为4
肿瘤微血管栓塞治疗对于实体瘤尤其是中晚期实体瘤具有独特的治疗优势。肿瘤微血管栓塞药物的构成为凝血激活物和肿瘤微血管靶向分子,目前研究较多的是以截短组织因子为凝血激活物的融合蛋白药物,可在一定浓度下有效抑制肿瘤生长。寻找更加有效的靶向分子并采取综合治疗,可进一步提升药效,具有较好的应用前景。
胃癌发生率和死亡率较高,预后较差,是全球癌症的防治重点。早期胃癌检出率低,癌细胞侵袭和转移是影响胃癌预后的重要因素。微小RNA(miRNA,miR)-218是一种肿瘤抑制miRNA,最近研究数据显示,miR-218在胃癌中表达下调,与胃癌发生和发展密切相关。本文重点分析miR-218在胃癌中表达与癌细胞增殖、侵袭和转移的关系,以期为胃癌靶向治疗提供理论依据。
目的探讨骨形成蛋白4(BMP4)对单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾间质纤维化的影响。方法将雄性C57BL/6小鼠随机分为腹腔注射生理盐水假手术组(saline-Sham,n=8)、腹腔注射生理盐水UUO组(saline-UUO,n=8)、腹腔注射抗BMP4抗体(anti-BMP4)假手术组(anti-BMP4-Sham,n=8)、腹腔注射anti-BMP4 UUO组(anti-BMP4-UUO,n=
目的基于c-Jun氨基末端激酶信号通路观察黄芩素对胃癌AGS细胞增殖及凋亡的影响。方法以膜联蛋白V(Annexin V)染色检测黄芩素干预后胃癌AGS细胞凋亡,进而用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测黄芩素干预对胃癌AGS细胞增殖的影响。通过蛋白质印迹法(Western blot)检测黄芩素干预后c-Jun氨基末端激酶信号通路下游信号分子B淋巴细胞瘤-2、c-Jun蛋白表达。应用SPSS 18.0统
目的观察胃癌正常组织与癌组织中微小RNA(miRNA,miR)-675的表达及其对患者预后的影响,检测miR-675对胃腺癌细胞株(SGC-7901)生物学行为的影响,探讨miR-675在胃癌发生发展中的作用。方法下载肿瘤基因图谱(TCGA)胃癌数据库中miRNA数据并分析miR-675在胃癌的癌及癌旁组织中的表达水平及对患者预后的影响。采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测30对胃