【摘 要】
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目的 探究核因子κB(NF-κB)抑制剂(BAY11-7082)联合核因子E2相关因子2(Nrf2)抑制剂(ML385)对人结肠癌细胞HCT116的作用机制.方法 体外培养人结肠癌细胞HCT116,将细胞分为4组:空白对照组、NF-κB抑制剂组、Nrf2抑制剂和联合组.空白对照组以RPMI-1640培养基进行培养,NF-κB抑制剂组以10μmol·L-1 BAY 11-7082干预,Nrf2抑制剂组以5μmol·L-1 ML385干预,联合组以10μmol·L-1 BAY 11-7082+5μmol·L-
【机 构】
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湖南中医药大学, 研究生院,湖南长沙410208;湖南中医药大学,中医药防治眼耳鼻咽喉疾病湖南省重点实验室,湖南长沙410208;湖南中医药大学,湖南省中医药防治眼耳鼻咽喉疾病与视功能保护工程技术研究
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目的 探究核因子κB(NF-κB)抑制剂(BAY11-7082)联合核因子E2相关因子2(Nrf2)抑制剂(ML385)对人结肠癌细胞HCT116的作用机制.方法 体外培养人结肠癌细胞HCT116,将细胞分为4组:空白对照组、NF-κB抑制剂组、Nrf2抑制剂和联合组.空白对照组以RPMI-1640培养基进行培养,NF-κB抑制剂组以10μmol·L-1 BAY 11-7082干预,Nrf2抑制剂组以5μmol·L-1 ML385干预,联合组以10μmol·L-1 BAY 11-7082+5μmol·L-1 ML385干预,干预时间为24 h.MTT法检测人结肠癌细胞HCT116增殖抑制率,以流式细胞术和Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡状况,以蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白及Nrf2、NF-κB通路相关蛋白表达水平.结果 ML385、BAY 11-7082均能显著抑制人结肠癌细胞HCT116增殖(均P<0.05);干预24 h,空白对照组、Nrf2抑制剂组、NF-κB抑制剂组和联合组的细胞凋亡率分别为(1.77±0.60)％,(19.41±1.87)％,(21.55±2.33)％和(39.84±1.22)％;这4组的B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)的相对表达量分别为1.00,1.53±0.28,1.43±0.30和3.47±0.70;这4组的生存素蛋白的相对表达量分别为1.00,0.60±0.11,0.32±0.10和0.32±0.12;这4组的X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)的相对表达量分别为1.00,0.50±0.11,0.19±0.06和0.25±0.04.空白对照组、Nrf2抑制剂组和NF-κB抑制剂组的NF-κB蛋白的相对表达量分别为1.00,0.71±0.10和0.44±0.06;这3组的IκB蛋白分别为1.00,0.37±0.15和0.33±0.13;这3组的Nrf2蛋白分别为1.00,0.14±0.09和0.75±0.08.Nrf2抑制剂组、NF-κB抑制剂组和联合组与空白对照组比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 NF-κB抑制剂联合Nrf2抑制剂可协同诱导人结肠癌细胞HCT116凋亡,该效应可能与下调Survivin和XIAP的表达、上调Bax表达有关.
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