A型口蹄疫病毒VP3基因的克隆及原核表达

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从实验室冻存的含A型口蹄疫病毒的细胞中提取FMDV总RNA,通过RT—PCR获得cDNA。并根据FM—DV全基因组序列设计了1对针对VP3基因的引物,通过PCR扩增得到目的基因VP3并亚克隆人pMD18-T载体。将鉴定出的阳性质粒和表达载体PET32a用BamHI、HindHI双酶切回收后连接,获得阳性重组质粒PET32-VP3。用IPTG诱导重组质粒表达目的蛋白VP3,并用SDS—PAGE进行检测,表达产物用镍亲和树脂进行纯化。结果证明口蹄疫病毒VP3蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达且表达产物得到了纯化,
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