肿节风注射液对U937细胞的增殖抑制作用及CD80、CD86分子表达的影响

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目的:观察肿节风注射液(sarcandra glabra injection,SGI)对白血病U937细胞的增殖抑制作用及共刺激分子CD80、CD86表达的影响。方法:选用白血病U937细胞作为靶细胞,采用MTT法观察不同浓度的SGI对体外培养U937细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测药物处理前后细胞凋亡百分率及细胞表面共刺激分子CD80、CD86表达;激光共聚焦显微镜观察药物处理后U937细胞凋亡早、晚期的形态学变化;DNA凝胶电泳观察典型DNA梯形条带。结果:MTT显示不同浓度的SGI对白血病U937细胞均有不同程度的增殖抑制作用。与对照组比较,低浓度(1.83g/L)差异不明显,但随药物浓度(2.75~7.32g/L)的增加,抑制作用呈剂量依赖性(P<0.05,P<0.01)。流式细胞术检测结果显示药物处理48小时后,Annexin-V+/PI-的百分率随SGI浓度增加而明显升高。激光共聚焦显微镜发现细胞凋亡早期,细胞膜上Annexin-V表达阳性(Annexin-V+),核阴性(PI-);凋亡晚期两者均表达阳性。DNA凝胶电泳清晰可见典型的DNA梯形条带。对CD80、CD86表达检测显示,不同浓度的SGI处理24小时后,CD80表达分别为4.1%~16.5%;CD86则需要处理48小时后,随浓度增加而升高(2.5%~20.7%),但两者均与时间无依赖性。结论:SGI在一定浓度下能抑制白血病U937细胞增殖,诱导细胞凋亡,在SGI的诱导下,表面共刺激分子CD80、CD86表达均有不同程度的增加。
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