CTP—HBcAg18-27-Tapasin融合表达载体的构建及其表达和纯化

来源 :胃肠病学和肝病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:luoxingrobin
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目的构建CTP-HBcAg18-27-Tapasin融合基因表达质粒并分离、纯化融合蛋白。方法以质粒pCMV-SPORT6中Tapasin基因为模板,设计一对引物,上游引物带有融合基因CTP-HBcAg,18-27序列,进行PCR反应;PCR产物回收纯化克隆到质粒pREST-B中,双酶切及测序鉴定;将鉴定正确的质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)诱导表达;镍柱亲和层析法纯化融合蛋白;Westernblotting鉴定融合蛋白。结果由质粒pCMV-SPORT6 PCR扩增得到1480bp大小的条带,为CTP
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