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探讨环指蛋白43(RNF43)对类风湿关节炎-滑膜成纤维细胞(RA-FLS)分泌MMPs的影响。
方法取膝关节置换术的RA患者滑膜组织,酶消法体外培养RA-FLS,构建RNF43慢病毒过表达质粒,转染后利用实时荧光定量(qRT)-PCR检测转染效率。转染成功后提取细胞RNA及培养液上清,分别通过qRT-PCR、ELISA检测MMP-1、MMP-3、MMP-13 mRNA及蛋白表达情况。采用独立样本t检验进行统计分析。
结果当感染复数40时并加用聚凝胺可满足实验要求,RNF43的mRNA较空病毒对照组升高26 158倍。与空病毒对照组相比,RNF43过表达组MMP-1、MMP-3、MMP-13的mRNA[(0.19±0.06),t=28.314,P<0.05;(0.28±0.07),t=23.413,P<0.05;(0.21±0.09),t=18.365,P<0.05]及蛋白[(31.0±9.4)pg/ml,(17.1±2.1)pg/ml,t=3.198,P=0.029]、MMP-3[(38.7±8.1)pg/ml,(24.9±3.5)pg/ml,t=3.514,P=0.015]、MMP-13[(31.0±5.4)pg/ml,(20.6±2.9)pg/ml,t=5.632,P=0.001]均明显减少。
结论RNF43可能通过抑制Wnt信号通路活性对RA-FLS分泌MMPs起抑制作用。