【摘 要】
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前期研究在毕赤酵母中分泌表达了犬α干扰素(CaIFN),其活性较高但产量未达到理想水平.目前工作的重点是提高重组蛋白产量.构建含有1、2、4、6、8拷贝CaIFN基因的酵母转化子,其中KM-6CaIFN产量最高,与KM-1CaIFN相比提高了200.6％.共表达8种分子伴侣,其中Hac蛋白能够提高KM-6CaIFN和KM-8CaIFN的目的蛋白产量,提高幅度分别为32.1％和113.1％.在此基础上继续增加CaIFN拷贝数,可观察到KM-12CaIFN-Hac的产量最高,是KM-8CaIFN-Hac的1.
【机 构】
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江苏省农业科学院动物免疫工程研究所 南京 210014;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心 扬州 225009;江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地 南京 2100
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前期研究在毕赤酵母中分泌表达了犬α干扰素(CaIFN),其活性较高但产量未达到理想水平.目前工作的重点是提高重组蛋白产量.构建含有1、2、4、6、8拷贝CaIFN基因的酵母转化子,其中KM-6CaIFN产量最高,与KM-1CaIFN相比提高了200.6％.共表达8种分子伴侣,其中Hac蛋白能够提高KM-6CaIFN和KM-8CaIFN的目的蛋白产量,提高幅度分别为32.1％和113.1％.在此基础上继续增加CaIFN拷贝数,可观察到KM-12CaIFN-Hac的产量最高,是KM-8CaIFN-Hac的1.33倍,同时是KM-1CaIFN的5.61倍.通过与梯度稀释的BSA进行蛋白质条带比较,评估KM-12CaIFN-Hac的靶蛋白产量约为581 mg/L,为目前报道中酵母产犬α干扰素最高值.
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