【摘 要】
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目的探索小鼠骨髓来源的单个核细胞向肝细胞分化的诱导条件.方法通过密度梯度离心的方法获得小鼠骨髓来源的单个核细胞;在含有100 g/L新生牛血清的IMDM培养液中添加细胞因子H
【机 构】
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浙江省绍兴市人民医院医学分子实验室,浙江大学生命科学学院,浙江省绍兴市人民医院妇产科
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目的探索小鼠骨髓来源的单个核细胞向肝细胞分化的诱导条件.方法通过密度梯度离心的方法获得小鼠骨髓来源的单个核细胞;在含有100 g/L新生牛血清的IMDM培养液中添加细胞因子HGF 20 ng/ml、FGF-4 10ng/ml和OSM10ng/ml,诱导骨髓来源的单个核细胞向肝细胞分化.结果小鼠骨髓单个核细胞在3种细胞因子的诱导下,随着时间的延长,体积逐渐增大、形态上向上皮样细胞转变,胞浆丰富,出现双核或多核细胞;半定量RT-PCR的结果显示,甲胎蛋白(AFP)和细胞角蛋白19(CK19)的表达量在诱导初期首先增加,在诱导后期逐渐减少,而白蛋白(ALB)、细胞角蛋白18(CK18)以及酪胺酸胺基转移酶(TAT)的表达与诱导时间呈线性关系;免疫荧光检测诱导3周后的细胞,AFP、CK19、CK18和ALB均为阳性表达;诱导3周的细胞PAS糖原合成反应呈阳性,说明已经具备糖元合成和储存这一肝细胞的特征性功能.结论培养液中添加3种细胞因子(HGF、FGF-4和OSM)组合可以诱导小鼠单个核细胞向肝细胞分化.
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