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[摘 要]介绍了几种食品中亚硫酸盐的测定方法，评析其优缺点，建议迅速建立起一种广泛适用于检测各种食品中亚硫酸盐的的离子色谱法。
[关键词]食品；亚硫酸盐；测定方法；离子色谱法
中图分类号：TL271+.4 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2016）03-0348 -01
食品中的亚硫酸盐通常是指二氧化硫及能够产生二氧化硫的无机亚硫酸盐的统称【1】，主要来源于食品生产工艺中的一些添加剂，如亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、焦亚硫酸盐等广泛使用的漂白剂、脱色剂、防腐剂和抗氧化剂，它们与食品中的糖、蛋白、色素、酶、维生素、醛、酮等作用后，以SO32-形式残留在食品中，如果使用硫磺作为漂白熏蒸剂时，食品中还会残留一部分游离的SO2。
食品专家认为，亚硫酸盐进入人体后，会被组织细胞中的亚硫酸氧化酶氧化成无毒害的SO42-，随尿液排出体外，因此，少量的亚硫酸盐进入机体可以认为是安全无害的。但过量摄入，可能导致胃肠障碍、肾脏障碍，严重时还有可能引起红血球、血红蛋白的减少，甚至有间接的致癌作用，世界卫生组织（WHO）规定每人每日允许摄入量为0～0.7mg/kg體重（以二氧化硫计）。随着对食品安全的日益关注，食品中亚硫酸盐的使用及含量也已成为人们关注的对象。第41届国际食品添加剂法典会议上，CCFA倡议各成员收集各国市场上食品和饮料中亚硫酸盐的使用资料，为下一步关于亚硫酸盐类使用水平的修订审议提供依据，世界各国也纷纷出台各种法规标准来限制亚硫酸盐的使用，美国要求对亚硫酸盐使用量超过10mg/kg的食品必须必需予以明示，并针对不同食品，限定亚硫酸盐残留量范围在50～200 mg/kg，我国国家标准GB2760也作出明确规定，残留量范围在10～400 mg/kg。
测定食品中亚硫酸盐的方法很多，常常需要根据样品种类和实验室条件选择经济、快速、准确的方法。目前，国内外的标准检测方法主要分为比色法、碘量法和蒸馏-碱滴定法，不少学者根据具体情况，对标准方法作了进一步的研究改进，甚至发展出了许多新的检测方法，现将其整理如下，供大家参考。
1 比色法
盐酸副玫瑰苯胺比色法【2】属于直接比色法，其原理是亚硫酸盐和四氯汞钠反应生成稳定的络合物，再与甲醛及盐酸副玫瑰苯胺作用生成紫红色络合物，与标准系列比较定量。该方法为GB/T5009.34中规定的仲裁方法，但分析时间长达4h以上，且形成的络合物易与试样中干扰物质反应，影响实际结果，操作过程中使用了有毒的四氯汞钠溶液做吸收液，易对环境造成汞污染并严重影响操作者的身体健康。针对此缺陷，迅速发展了一系列无汞盐比色法。当采用无毒试剂三乙醇胺（0.5%）作为吸收液时，在560nm波长下测定食糖、饼干、白葡萄酒三类食品中二氧化硫的含量，加标回收率可达95～103%【3】。如果利用0.05%三乙
醇胺吸收液，在579nm波长下测定其吸光度，当白砂糖中的二氧化硫浓度在0～60mg/kg范围内有良好的线性关系，检出限为0.5mg/kg，测定结果与国标无显著差异【4】。还可以利用EDTA二钠缓冲液或者甲醛缓冲液作吸收液，也可以获得良好的效果。一些学者专门做了四氯汞钠和甲醛的对比试验，再次证实了用甲醛
缓冲液做吸收液的可行性。
日本卫生协会采用“蒸馏-比色法”，将酸化后的样品在氮气流中加热蒸馏，用氢氧化钠溶液接收，接收液与碱性品红和甲醛的混合液发生显色反应，与标准曲线比较后定量，该方法灵敏度高，但对试剂要求也很高。
2 碘量法
GB/T5009.34中第二法属于“蒸馏-碘量法”，在密闭容器中蒸馏酸化后的样品，释放出其中的SO2 ，通过乙酸铅溶液接收，浓盐酸酸化后用碘标液滴定。该方法操作耗时，如果采用凯氏定氮仪进行蒸馏，与自动电位滴定仪联用，可实现日蒸馏滴定样品达几十份，大大提高了工作效率。
葡萄酒总局采用的快速检测方法则不经蒸馏，将被测成分全部转化为亚硫酸盐，再在硫酸作用下使之游离出来，按后用碘标液滴定，当该方法仅局限于葡萄酒中亚硫酸盐的测定，应用范围狭窄。
3 蒸馏-碱滴定法
该法是许多国外检测机构现行的检测方法，酸化后的样品在氮气流中蒸馏，以过量氢氧化钠接收，再将接收液经酸化、氧化生成硫酸，用氢氧化钠标液滴定。该法适用范围广，终点易于判定，但对操作要求较高。
4 其他测定方法
有学者在测定葡萄酒中二氧化硫残留量时，用甲醛吸收液吸收经蒸馏释放出的二氧化硫，以邻二氮菲-铁（Ⅱ）作显色剂，在510nm波长处测定吸光度， RSD为1.9%，加标回收率可达95～103%。
检测山药中的二氧化硫时，可选用0.2mol/L的盐酸溶液处理样品，采用顶空气相色谱-火焰光度检测器，得出结果二氧化硫在21～210μg/ml范围内呈较好的线性关系，方法简单，专属性强，灵敏度高，重复性好。
在分析啤酒中二氧化硫的测定方法时，可采用化学分析仪流动注射分析法，该方法结合了空气分离式连续流动分析的低分散和流动注射分析的高速度双重优点，检测过程自动化，大大提高了检测效率。
测定黄花菜中的亚硫酸盐时，有报道用水浸提亚硫酸盐，以甲醛作为稳定剂，建立了离子交换-电导检测离子色谱法的方法，检出限可达0.05mg/kg。
利用离子色谱法时，还可通过在酸性条件下蒸馏出样品中的SO2，经过氧化氢氧化吸收，全部转化为SO42-形式加以测定，测定结果与国标碘量法比对，无显著差异。
但潘炜等用13种实验材料作了对比试验，证明在使用蒸馏-离子色谱法测定辛辣食品中的亚硫酸盐时，由于辛辣食品成分复杂，其自身的含硫化合物在强酸条件下蒸馏后以SO2形式逸出，采用碱性过氧化氢氧化吸收时，则会呈极高含量的SO42-被检出，使得本未引入外源性亚硫酸盐的样品呈现假阳性并可能超出标准限量。他建议采用碱性的离子色谱流动相加甲醛做吸收液将其吸收并转化成SO32-，通过阴离子色谱柱分离后检测SO32-，可避免样品本身含硫物质的干扰。又分别用萝卜、洋葱、辣根片做实验对象，与蒸馏-滴定法、蒸馏-比色法做了对比试验，三种方法结果相差很大，再次证明了样品自身含硫物质对实验结果的影响。通过适应性试验、精密度试验和回收率实验，证实了该方法可准确测定大部分辛辣食品中SO32-和SO2的含量。
近年来，随着国际贸易日益增多，外方对许多食品都要求准确检测其中的亚硫酸盐含量，这就给我国的检测机构提出了发展新方法、采用新技术的要求。综合各种参考文献，笔者认为离子色谱灵敏度高、快捷安全，是目前阴离子分析的首选方法。而针对食品中亚硫酸盐的测定，已有很多报道，但多数方法仅仅局限于某几种食品或几类食品的检验。因此迅速建立起一种能够通用的离子色谱检测方法，更新国家标准，势在必行。
参考文献
【1】 崔韶晖，李婷婷，陈曦.魔芋精粉中二氧化硫残留量的几种测定方法比较.安徽农业科学，2009，37（2）：472-473，479
【2】 中华人民共和国卫生部，中国国家标准化管理委员会.食品中亚硫酸盐的测定GB/T5009.34-2003.中国标准出版社，2003：269-273
【3】 方刑有，高志贤.食品中亚硫酸盐的三乙醇胺吸收法检测.中国公共卫生.2006，22（2）：245
作者简介：黄惠敏（1982--），女，工程师，硕士研究生，主要从事食品检验工作，联系电话18839576282
[关键词]食品；亚硫酸盐；测定方法；离子色谱法
中图分类号：TL271+.4 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2016）03-0348 -01
食品中的亚硫酸盐通常是指二氧化硫及能够产生二氧化硫的无机亚硫酸盐的统称【1】，主要来源于食品生产工艺中的一些添加剂，如亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、焦亚硫酸盐等广泛使用的漂白剂、脱色剂、防腐剂和抗氧化剂，它们与食品中的糖、蛋白、色素、酶、维生素、醛、酮等作用后，以SO32-形式残留在食品中，如果使用硫磺作为漂白熏蒸剂时，食品中还会残留一部分游离的SO2。
食品专家认为，亚硫酸盐进入人体后，会被组织细胞中的亚硫酸氧化酶氧化成无毒害的SO42-，随尿液排出体外，因此，少量的亚硫酸盐进入机体可以认为是安全无害的。但过量摄入，可能导致胃肠障碍、肾脏障碍，严重时还有可能引起红血球、血红蛋白的减少，甚至有间接的致癌作用，世界卫生组织（WHO）规定每人每日允许摄入量为0～0.7mg/kg體重（以二氧化硫计）。随着对食品安全的日益关注，食品中亚硫酸盐的使用及含量也已成为人们关注的对象。第41届国际食品添加剂法典会议上，CCFA倡议各成员收集各国市场上食品和饮料中亚硫酸盐的使用资料，为下一步关于亚硫酸盐类使用水平的修订审议提供依据，世界各国也纷纷出台各种法规标准来限制亚硫酸盐的使用，美国要求对亚硫酸盐使用量超过10mg/kg的食品必须必需予以明示，并针对不同食品，限定亚硫酸盐残留量范围在50～200 mg/kg，我国国家标准GB2760也作出明确规定，残留量范围在10～400 mg/kg。
测定食品中亚硫酸盐的方法很多，常常需要根据样品种类和实验室条件选择经济、快速、准确的方法。目前，国内外的标准检测方法主要分为比色法、碘量法和蒸馏-碱滴定法，不少学者根据具体情况，对标准方法作了进一步的研究改进，甚至发展出了许多新的检测方法，现将其整理如下，供大家参考。
1 比色法
盐酸副玫瑰苯胺比色法【2】属于直接比色法，其原理是亚硫酸盐和四氯汞钠反应生成稳定的络合物，再与甲醛及盐酸副玫瑰苯胺作用生成紫红色络合物，与标准系列比较定量。该方法为GB/T5009.34中规定的仲裁方法，但分析时间长达4h以上，且形成的络合物易与试样中干扰物质反应，影响实际结果，操作过程中使用了有毒的四氯汞钠溶液做吸收液，易对环境造成汞污染并严重影响操作者的身体健康。针对此缺陷，迅速发展了一系列无汞盐比色法。当采用无毒试剂三乙醇胺（0.5%）作为吸收液时，在560nm波长下测定食糖、饼干、白葡萄酒三类食品中二氧化硫的含量，加标回收率可达95～103%【3】。如果利用0.05%三乙
醇胺吸收液，在579nm波长下测定其吸光度，当白砂糖中的二氧化硫浓度在0～60mg/kg范围内有良好的线性关系，检出限为0.5mg/kg，测定结果与国标无显著差异【4】。还可以利用EDTA二钠缓冲液或者甲醛缓冲液作吸收液，也可以获得良好的效果。一些学者专门做了四氯汞钠和甲醛的对比试验，再次证实了用甲醛
缓冲液做吸收液的可行性。
日本卫生协会采用“蒸馏-比色法”，将酸化后的样品在氮气流中加热蒸馏，用氢氧化钠溶液接收，接收液与碱性品红和甲醛的混合液发生显色反应，与标准曲线比较后定量，该方法灵敏度高，但对试剂要求也很高。
2 碘量法
GB/T5009.34中第二法属于“蒸馏-碘量法”，在密闭容器中蒸馏酸化后的样品，释放出其中的SO2 ，通过乙酸铅溶液接收，浓盐酸酸化后用碘标液滴定。该方法操作耗时，如果采用凯氏定氮仪进行蒸馏，与自动电位滴定仪联用，可实现日蒸馏滴定样品达几十份，大大提高了工作效率。
葡萄酒总局采用的快速检测方法则不经蒸馏，将被测成分全部转化为亚硫酸盐，再在硫酸作用下使之游离出来，按后用碘标液滴定，当该方法仅局限于葡萄酒中亚硫酸盐的测定，应用范围狭窄。
3 蒸馏-碱滴定法
该法是许多国外检测机构现行的检测方法，酸化后的样品在氮气流中蒸馏，以过量氢氧化钠接收，再将接收液经酸化、氧化生成硫酸，用氢氧化钠标液滴定。该法适用范围广，终点易于判定，但对操作要求较高。
4 其他测定方法
有学者在测定葡萄酒中二氧化硫残留量时，用甲醛吸收液吸收经蒸馏释放出的二氧化硫，以邻二氮菲-铁（Ⅱ）作显色剂，在510nm波长处测定吸光度， RSD为1.9%，加标回收率可达95～103%。
检测山药中的二氧化硫时，可选用0.2mol/L的盐酸溶液处理样品，采用顶空气相色谱-火焰光度检测器，得出结果二氧化硫在21～210μg/ml范围内呈较好的线性关系，方法简单，专属性强，灵敏度高，重复性好。
在分析啤酒中二氧化硫的测定方法时，可采用化学分析仪流动注射分析法，该方法结合了空气分离式连续流动分析的低分散和流动注射分析的高速度双重优点，检测过程自动化，大大提高了检测效率。
测定黄花菜中的亚硫酸盐时，有报道用水浸提亚硫酸盐，以甲醛作为稳定剂，建立了离子交换-电导检测离子色谱法的方法，检出限可达0.05mg/kg。
利用离子色谱法时，还可通过在酸性条件下蒸馏出样品中的SO2，经过氧化氢氧化吸收，全部转化为SO42-形式加以测定，测定结果与国标碘量法比对，无显著差异。
但潘炜等用13种实验材料作了对比试验，证明在使用蒸馏-离子色谱法测定辛辣食品中的亚硫酸盐时，由于辛辣食品成分复杂，其自身的含硫化合物在强酸条件下蒸馏后以SO2形式逸出，采用碱性过氧化氢氧化吸收时，则会呈极高含量的SO42-被检出，使得本未引入外源性亚硫酸盐的样品呈现假阳性并可能超出标准限量。他建议采用碱性的离子色谱流动相加甲醛做吸收液将其吸收并转化成SO32-，通过阴离子色谱柱分离后检测SO32-，可避免样品本身含硫物质的干扰。又分别用萝卜、洋葱、辣根片做实验对象，与蒸馏-滴定法、蒸馏-比色法做了对比试验，三种方法结果相差很大，再次证明了样品自身含硫物质对实验结果的影响。通过适应性试验、精密度试验和回收率实验，证实了该方法可准确测定大部分辛辣食品中SO32-和SO2的含量。
近年来，随着国际贸易日益增多，外方对许多食品都要求准确检测其中的亚硫酸盐含量，这就给我国的检测机构提出了发展新方法、采用新技术的要求。综合各种参考文献，笔者认为离子色谱灵敏度高、快捷安全，是目前阴离子分析的首选方法。而针对食品中亚硫酸盐的测定，已有很多报道，但多数方法仅仅局限于某几种食品或几类食品的检验。因此迅速建立起一种能够通用的离子色谱检测方法，更新国家标准，势在必行。
参考文献
【1】 崔韶晖，李婷婷，陈曦.魔芋精粉中二氧化硫残留量的几种测定方法比较.安徽农业科学，2009，37（2）：472-473，479
【2】 中华人民共和国卫生部，中国国家标准化管理委员会.食品中亚硫酸盐的测定GB/T5009.34-2003.中国标准出版社，2003：269-273
【3】 方刑有，高志贤.食品中亚硫酸盐的三乙醇胺吸收法检测.中国公共卫生.2006，22（2）：245
作者简介：黄惠敏（1982--），女，工程师，硕士研究生，主要从事食品检验工作，联系电话18839576282