【摘 要】
：
为了正确表达禽呼肠孤病毒(ARV)σA蛋白,试验拟构建σA基因的真核表达质粒,并将其在人胚肾细胞(HEK293T)中准确表达,参照Gen Bank中ARV S2基因序列(登录号为KF741763.1)设计
【机 构】
：
广西大学动物科学技术学院; 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室;
【基金项目】
：
国家自然科学基金项目(31660715;31160512);广西科技项目(2018GXNSFAA138106)
论文部分内容阅读
为了正确表达禽呼肠孤病毒(ARV)σA蛋白,试验拟构建σA基因的真核表达质粒,并将其在人胚肾细胞(HEK293T)中准确表达,参照Gen Bank中ARV S2基因序列(登录号为KF741763.1)设计特异性引物,以pMD18-T-σA重组载体为模板,应用PCR的方法扩增σA基因的特异性序列,并将其克隆到pMD18-T载体,构建重组载体pMD18-T-σA,再用限制性内切酶KpnⅠ和NotⅠ同时双酶切pMD18-T-σA和真核表达质粒pEF1α-HA,将胶回收的σA基因和pEF1α-HA片段进行连接,构建真核表达质粒pEF1α-HA-σA。真核表达质粒经菌落PCR、双酶切和测序验证正确后,将其转染HEK293T细胞,于24 h后收取蛋白质,通过Western-blot验证目的蛋白。结果表明:本试验成功克隆了禽呼肠孤病毒σA基因,构建了其真核表达质粒pEF1α-HA-σA,并在HEK293T细胞中表达。说明了该蛋白可以在HEK293T细胞中准确表达。
其他文献
本文遵循现代企业管理及新产品开发战略思想，采用理论联系实际、调查研究、统计数学分析和预测的方法，通过对华锦集团盘锦乙烯有限责任公司的内外部环境进行认真的分析和研究，明
改革开放20年来，为缓解和消灭绝对贫困，我国通过强有力的国家行动和经济改革，开展了卓有成效的扶贫开发工作，绝对贫困人口已从1978年的2.5亿人减少到1999年的3412万人，取得了历史
在当前正在进行的民事审判改革中，法官的职权逐渐被弱化，相应地律师在诉讼中的作用变得越来越重要。本文首先以实证分析的方法对我国律师代理民事诉讼的现状进行了认真的考察，指
为了能够提高调度自动化机房机柜卡扣式金属外套螺母的安装与拆卸效率，减轻设备维护人员的工作强度，提高工作效率，增强维护人员工作时的安全性。文中介绍了一种机柜卡扣式金属外
智慧城市发展背景下的公共服务智慧化建设是城市建设的重要内容。新兴二线城市如何智慧化建设公共服务是当前面临的重要问题。智慧贵阳建设正值发展阶段,其中交通智慧化发展
研究轨道式自动引导车(RailGuideVehicle,RGV)的动态调度问题,建立了基于多阶段决策的动态规划模型和改进的顺序调度模型;对于无故障的生产问题建立多阶段决策的动态规划模型
对于大型商业和公共建筑物,机电设备的正常运作是物业管理的基本要求,但机电设备故障是无法避免的事实,一旦发生机电设备出现问题,如何快速确定故障点,并能快速处理事故,是大
中国在经济实力不够雄厚,承受能力还不够强的情况下,提前进入了人口老龄化状态。在如此严峻的挑战以及老龄化的社会背景下,传播孝文化是对个人物质和精神世界的双重满足,对于
学术期刊的影响力是一个关涉学术期刊学术影响力、社会实践影响力和读者、社会认可度等多方面因素的复杂现象,是某一学术期刊以学术水平、学术特色为根本,社会信誉度与读者认