幽门螺杆菌空泡毒素表达系统的构建及其鉴定

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【摘要】

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采用常规酚-氯仿法提取幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床菌株Y06株基因组DNA,用PCR扩增空泡毒素(vacA)基因,T-A克隆后测序,亚克隆构建表达载体,采用Ni-NTA亲和层析法

【作者】

：

孙爱华严杰

【机构】

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浙江医学高等专科学校医学检验系,浙江大学医学院病原生物学教研室

【出处】

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微生物学杂志

【发表日期】

：

2003年2期

【关键词】

：

幽门螺杆菌空泡毒素表达载体构建免疫性鉴定

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采用常规酚-氯仿法提取幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床菌株Y06株基因组DNA,用PCR扩增空泡毒素(vacA)基因,T-A克隆后测序,亚克隆构建表达载体,采用Ni-NTA亲和层析法提纯表达产物,SDS-PAGE和Westernblot分别检测表达产物的分子量和免疫性.所构建的表达系统能表达vacA,其产物可与相应抗体结合.重组vacA能有效地诱导家兔产生抗体,该抗体也能与重组vacA发生结合反应.

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