【摘 要】
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目的 比较东方田鼠抗日本血吸虫基因HSP90α和KPNA2的表达差异及体内抗虫效果差异. 方法 RT-PCR扩增并比较健康东方田鼠新分离的心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉、皮肤、骨髓组
【机 构】
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湖南文理学院/生命与环境科学学院,动物学湖南省高校重点实验室,湖南文理学院环洞庭湖生物资源保育与利用研究中心,湖南文理学院生命与环境科学学院动物健康养殖研究所,湖南文理学院农业生物大分子研究中心,常德
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目的 比较东方田鼠抗日本血吸虫基因HSP90α和KPNA2的表达差异及体内抗虫效果差异. 方法 RT-PCR扩增并比较健康东方田鼠新分离的心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉、皮肤、骨髓组织中HSP90α和KPNA2的表达情况.40只雄性昆明小鼠随机分为空白对照组(DMEM培养基)、阴性对照组(pLXSN质粒转染病毒)、pLXSN-HSP90α组和pLXSN-KPNA2组等4组,每组10只,各组分别于第1、3、7d每鼠尾静脉注射重组质粒转染病毒(2×106 cfu/ml)或培养基0.2 ml.注射后第2天,各组小鼠腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴(30±2)尾/鼠.感染后第42天,剖杀小鼠,门脉灌注检获成虫,测量死亡后合抱及单性虫体长度,计算虫荷、减虫率、每克肝虫卵数(LEPG)、肝脏减卵率,HE染色观察肝脏病理变化,观察比较HSP90α和KPNA2对日本血吸虫感染小鼠的保护效果. 结果 RT-PCR结果显示,HSP90α在东方田鼠脑、骨髓中高表达,而KPNA2在心、肾和肌肉中高表达.体内实验结果显示,pLXSN-HSP90α组和pLXSN-KPNA2组小鼠的肝脏颜色分别呈灰黄色和灰黑色,虫荷分别为(11.3±1.1)、(11.6±1.3)条,血吸虫成虫体长分别为(1.19±0.04)、(1.21±0.05) cm,LEPG分别为1 852.0±392.4、1 035±485.4,与阴性对照组[(16.7±1.3)条、(1.39±0.06) cm、3 644.0±523.6]比较差异均有统计学意义(P＜0.05).两个实验组的虫荷、成虫体长差异无统计学意义(P＞0.05),而LEPG指标差异有统计学意义(P＜0.05).两组减虫率分别为40.8％和39.4％ (P＞ 0.05),肝减卵率分别为57.9％和76.5％(P＜0.05),与阴性对照组(12.6％、17.3％)比较差异有统计学意义(P＜0.01).肝组织切片HE染色镜下观察显示,pLXSN-HSP90α组和pLXSN-KPNA2组小鼠的肝脏虫卵结节数量均远少于阴性对照. 结论 东方田鼠抗日本血吸虫基因HSP90α和KPNA2在脑、骨髓、心脏、肾脏和肌肉组织中表达存在差异;两者对日本血吸虫感染小鼠保护效果在减卵率和LEPG存在差异.
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