FPLC在纯化马铃薯酪氨酸酶中的应用

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对马铃薯酪氨酸酶的分离纯化进行了初探。其粗酶最佳硫酸铵盐析浓度65%,最佳温度30℃,最佳pH7.5。分别预装SephodexG75分子筛凝胶柱和HiTrip QFF阴离子交换层析柱在FPLC自动分离得到纯化的酪氨酸酶,最高纯化倍数达60,并以L—DOPA作底物,测得比酶活为242.84U/mg蛋白。对酶活最大的组分进行了SDS—PAGE表征,电泳呈现一条带,相对分子质量为5.6×10^4。米氏常数Km为2.0mmol/L。
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