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【摘 要】本实验对天麻头风灵胶囊的质量标准进行研究。含量测定方法：采用奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm），甲醇-水-36%乙酸（30：67：3）为流动相，检测波长为322nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃；鉴别方法：CMC-Na-G板，以 醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水（5：5：1：1）为展开剂，置紫外光灯（365nm）下观察荧光灯斑点。结论：本法简便、准确，可作为天麻头风灵胶囊的质量标准。
【关键词】天麻头风灵胶囊；质量标准；研究
天麻头风灵胶囊由天麻、牛膝、玄参、地黄、当归、杜仲、川芎、槲寄生、野菊花、钩藤组成。天麻头风灵胶囊具有滋阴潜阳，祛风，强筋骨的功效。天麻头风灵胶囊常用于顽固性头痛，长期手足麻木，慢性腰腿酸痛等。当归来源于伞形科东当归，又叫大和归、日本当归、延边当归。当归具有补血、活血、调经止痛、润燥滑肠的功效。当归具有抗缺氧、抗癌、护肤美容、补血活血、调节机体免疫功能、抑菌、抗动脉硬化的作用。川芎为伞形科植物川芎的根茎，具有活血行气，祛风止痛的功效。川芎常用于安抚神经、症瘕腹痛、跌扑肿痛、头痛、风湿痹痛等[1-5]。牛膝为苋科植物牛膝的根。牛膝具有补肝肾、强筋骨、活血通经、引火（血）下行、利尿通淋的功效。牛膝常用于下肢痿软、痛经、症瘕、胞衣不下、血淋、痈肿恶疮、咽喉肿痛等。本实验对天麻头风灵胶囊的质量标准进行研究。
1.仪器与试药
（1）仪器：DR/5000紫外可见分光光度计（上海安谱科学仪器有限公司）；PS3200超声波震荡器清洗机（普洛帝中国服务中心）；GL-21M高速冷冻离心机（湘仪离心机仪器有限公司）；SLGH超深度高精度恒温槽（南京顺流仪器有限公司）；RE-5298旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；LC1620高效液相色谱仪（上海益丝科贸有限公司）；XYG-H帕恩特痕量分析级超纯水机（北京湘顺源科技有限公司）；BSA124S电子分析天平（东莞康润仪器设备有限公司）。
（2）色谱柱：奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm）。
（3）对照品：阿魏酸。
（4）试剂： 醋酸乙酯（北京翰隆达科技发展有限公司）、丙酮（成都格雷西亚化学技术有限公司）、甲酸（天津市凯力达化工贸易有限公司）、甲醇（上海刘氏医药科技有限公司）、乙腈（沈阳市新光化工厂）。
（5）试药：天麻头风灵胶囊。
2.测定方法确定
2.1色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[6-14]。流动相：甲醇-水-36%乙酸（30：67：3） 为流动相，检测波长：322nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。理论板数按阿魏酸峰计算应不得低于2000。
2.2对照品溶液的制备
精密称取阿魏酸对照品适量，置容量瓶中，加流动相制成每1mL含20μg的溶液，即得。
2.3供试品溶液的制备
取天麻头风灵胶囊适量，研细，精密称定，加50毫升流动相超声提取30分钟，过滤，将滤液蒸至近干，残渣用流动相溶解后转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得。
2.4专属性试验
取天麻、牛膝、玄参、地黄、杜仲、槲寄生、野菊花、钩藤药材按样品制备工艺制成阴性对照样品，按上述实验方法检测，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.5精密度试验
取对照品溶液按上述色谱条件，精密吸取20μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.69%，表明本方法精密度良好。
2.6对照品的线性考察
精密称取适量阿魏酸对照品，加入流动相溶液使溶解分别配制成每毫升含5、10、20、30、40、50、60微克的溶液。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，阿魏酸在5～60μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.7重现性试验
称取同一批的天麻头风灵胶囊样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.83%，结果表明此方法的重现性良好。
2.8准确度试验
取对照品适量分别精密加入天麻头风灵胶囊中，按含量测定进行测定，计算回收率为99.6%，RSD为0.67%。
2.9样品含量测定
依照上述含量测定方法，再按外标法以峰面积计算样品的含量，结果三批样品的含量分别为320μg/g、313μg/g、321μg/g。
3.鉴别
取天麻头风灵胶囊适量（约相当于牛膝药材2g），乙醇超声提取30分钟，过滤，蒸干，加水溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，合并，用正丁醇饱和的水洗涤，正丁醇液蒸干，加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液。另取2克牛膝对照药材，按上述方法制备，作为对照品溶液。取天麻、玄参、地黄、当归、杜仲、川芎、槲寄生、野菊花、钩藤药材按样品制备工艺制成阴性对照样品，按上述方法制成阴性对照样品。照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一CMC-Na-G板上，以醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水（5：5：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下观察荧光灯斑点。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，而阴性对照无干扰。
4.结论
本实验分离效果好、方法简便、快捷、准确、专属性好，可用于天麻头风灵胶囊中阿魏酸的含量测定。样品与牛膝对照药材对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰。该鉴别方法专属性强，操作简单，可用于天麻头风灵胶囊中牛膝的鉴别。
【参考文献】
[1]贾绿琴，孙秀英.中药川芎的研究进展[J].黑龙江科技信息，2009（11）.
[2]马静，马玲.中药川芎中有效成分及药理作用研究进展[J].中国民族民间医药，2009（19）.
[3]舒冰，周重建，马迎辉，王拥军，施杞.中药川芎中有效成分的药理作用研究进展[J].中国药理学通报，2006（09）.
[4]李秋怡，干国平，刘焱文.川芎的化学成分及药理研究进展[J].时珍国医国药，2006（07）.
[5]周江.川芎有效成分及其药理作用研究概况[J].浙江中医杂志，2007（10）.
[6]邓容，刘新.HPLC法测定复方羊角软胶囊中阿魏酸的含量[J].重庆医科大学学报，2006（05）.
[7]姜建萍，韦志英，丘琴，肖聪，李生茂.HPLC法测定复方川芎丸中阿魏酸的含量[J].广西中医药，2006（05）.
[8]刘丰丰，青磊，王海宁，黄作苏.用高效液相色谱法测定阿归养血颗粒中阿魏酸的含量[J].贵阳医学院学报，2004（03）.
[9]李梅荣.HPLC测定祛风湿丸中阿魏酸的含量[J].安徽医药，2008（09）.
[10]张悦晗，张爱华，钟小群.RP-HPLC法测定复方当归滴丸中阿魏酸的含量[J].药学实践杂志，2003（06）.
[11]李艳秋.用HPLC法测定四川省不同产地的川芎中阿魏酸的含量[J].药学服务与研究，2009（02）.
[12]黄展文，梁云飞.HPLC法测定白带丸中阿魏酸的含量[J].广西中医学院学报，2006（02）.
[13]兰顺，叶冬梅.HPLC测定复方川芎胶囊中阿魏酸的含量[J].中成药，2004（10）.
[14]王峰.HPLC法测定党归益母口服液中阿魏酸的含量[J].光明中医，2008（10）.
【关键词】天麻头风灵胶囊；质量标准；研究
天麻头风灵胶囊由天麻、牛膝、玄参、地黄、当归、杜仲、川芎、槲寄生、野菊花、钩藤组成。天麻头风灵胶囊具有滋阴潜阳，祛风，强筋骨的功效。天麻头风灵胶囊常用于顽固性头痛，长期手足麻木，慢性腰腿酸痛等。当归来源于伞形科东当归，又叫大和归、日本当归、延边当归。当归具有补血、活血、调经止痛、润燥滑肠的功效。当归具有抗缺氧、抗癌、护肤美容、补血活血、调节机体免疫功能、抑菌、抗动脉硬化的作用。川芎为伞形科植物川芎的根茎，具有活血行气，祛风止痛的功效。川芎常用于安抚神经、症瘕腹痛、跌扑肿痛、头痛、风湿痹痛等[1-5]。牛膝为苋科植物牛膝的根。牛膝具有补肝肾、强筋骨、活血通经、引火（血）下行、利尿通淋的功效。牛膝常用于下肢痿软、痛经、症瘕、胞衣不下、血淋、痈肿恶疮、咽喉肿痛等。本实验对天麻头风灵胶囊的质量标准进行研究。
1.仪器与试药
（1）仪器：DR/5000紫外可见分光光度计（上海安谱科学仪器有限公司）；PS3200超声波震荡器清洗机（普洛帝中国服务中心）；GL-21M高速冷冻离心机（湘仪离心机仪器有限公司）；SLGH超深度高精度恒温槽（南京顺流仪器有限公司）；RE-5298旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；LC1620高效液相色谱仪（上海益丝科贸有限公司）；XYG-H帕恩特痕量分析级超纯水机（北京湘顺源科技有限公司）；BSA124S电子分析天平（东莞康润仪器设备有限公司）。
（2）色谱柱：奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm）。
（3）对照品：阿魏酸。
（4）试剂： 醋酸乙酯（北京翰隆达科技发展有限公司）、丙酮（成都格雷西亚化学技术有限公司）、甲酸（天津市凯力达化工贸易有限公司）、甲醇（上海刘氏医药科技有限公司）、乙腈（沈阳市新光化工厂）。
（5）试药：天麻头风灵胶囊。
2.测定方法确定
2.1色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[6-14]。流动相：甲醇-水-36%乙酸（30：67：3） 为流动相，检测波长：322nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。理论板数按阿魏酸峰计算应不得低于2000。
2.2对照品溶液的制备
精密称取阿魏酸对照品适量，置容量瓶中，加流动相制成每1mL含20μg的溶液，即得。
2.3供试品溶液的制备
取天麻头风灵胶囊适量，研细，精密称定，加50毫升流动相超声提取30分钟，过滤，将滤液蒸至近干，残渣用流动相溶解后转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得。
2.4专属性试验
取天麻、牛膝、玄参、地黄、杜仲、槲寄生、野菊花、钩藤药材按样品制备工艺制成阴性对照样品，按上述实验方法检测，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.5精密度试验
取对照品溶液按上述色谱条件，精密吸取20μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.69%，表明本方法精密度良好。
2.6对照品的线性考察
精密称取适量阿魏酸对照品，加入流动相溶液使溶解分别配制成每毫升含5、10、20、30、40、50、60微克的溶液。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，阿魏酸在5～60μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.7重现性试验
称取同一批的天麻头风灵胶囊样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.83%，结果表明此方法的重现性良好。
2.8准确度试验
取对照品适量分别精密加入天麻头风灵胶囊中，按含量测定进行测定，计算回收率为99.6%，RSD为0.67%。
2.9样品含量测定
依照上述含量测定方法，再按外标法以峰面积计算样品的含量，结果三批样品的含量分别为320μg/g、313μg/g、321μg/g。
3.鉴别
取天麻头风灵胶囊适量（约相当于牛膝药材2g），乙醇超声提取30分钟，过滤，蒸干，加水溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，合并，用正丁醇饱和的水洗涤，正丁醇液蒸干，加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液。另取2克牛膝对照药材，按上述方法制备，作为对照品溶液。取天麻、玄参、地黄、当归、杜仲、川芎、槲寄生、野菊花、钩藤药材按样品制备工艺制成阴性对照样品，按上述方法制成阴性对照样品。照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一CMC-Na-G板上，以醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水（5：5：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下观察荧光灯斑点。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，而阴性对照无干扰。
4.结论
本实验分离效果好、方法简便、快捷、准确、专属性好，可用于天麻头风灵胶囊中阿魏酸的含量测定。样品与牛膝对照药材对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰。该鉴别方法专属性强，操作简单，可用于天麻头风灵胶囊中牛膝的鉴别。
【参考文献】
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[5]周江.川芎有效成分及其药理作用研究概况[J].浙江中医杂志，2007（10）.
[6]邓容，刘新.HPLC法测定复方羊角软胶囊中阿魏酸的含量[J].重庆医科大学学报，2006（05）.
[7]姜建萍，韦志英，丘琴，肖聪，李生茂.HPLC法测定复方川芎丸中阿魏酸的含量[J].广西中医药，2006（05）.
[8]刘丰丰，青磊，王海宁，黄作苏.用高效液相色谱法测定阿归养血颗粒中阿魏酸的含量[J].贵阳医学院学报，2004（03）.
[9]李梅荣.HPLC测定祛风湿丸中阿魏酸的含量[J].安徽医药，2008（09）.
[10]张悦晗，张爱华，钟小群.RP-HPLC法测定复方当归滴丸中阿魏酸的含量[J].药学实践杂志，2003（06）.
[11]李艳秋.用HPLC法测定四川省不同产地的川芎中阿魏酸的含量[J].药学服务与研究，2009（02）.
[12]黄展文，梁云飞.HPLC法测定白带丸中阿魏酸的含量[J].广西中医学院学报，2006（02）.
[13]兰顺，叶冬梅.HPLC测定复方川芎胶囊中阿魏酸的含量[J].中成药，2004（10）.
[14]王峰.HPLC法测定党归益母口服液中阿魏酸的含量[J].光明中医，2008（10）.